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文献和实验
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库存 :25
英文名 :Recombinant Human PRKAB2
保质期 :说明书
供应商 :上海博湖
保存条件 :-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
规格 :50μg/200ug/1mg
公司产品仅供科研实验、不得用于临床产品名称 | Recombinant Human PRKAB2 |
货号 | P-Db1173 |
规格 | 50μg, 200μg, 1mg |
种属 | Human |
宿主 | Yeast |
表达区间 | 1-272 |
分子量 | 50.9 KDa |
标签 | N-terminal His-IF2DI Tag |
纯度 | Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses |
应用 | Western Blot, ELISA |
性状 | Lyophilized from a 0.2μm filtered solution in PBS with 5% trehalose, pH7.4 |
溶解方法 | Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex |
存储 | -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
别名 | AMPK beta 2, AMPK subunit beta 2, PRKAB2 |
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
特点:
Recombinant Human PRKAB2生物素标记:生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。
荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
公司正在销售的产品:
IL21R Protein Rat 重组大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 (His 标签)
Adiponectin 脂联素(多肽抗原 0.5mgAdiponectin 脂联素(多肽抗原)
FLT4重组小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein
KLK8 Protein Human 重组人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 (His 标签)
EPHA4重组人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 标签) Protein
HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
细胞间粘附分子5(ICAM5)重组蛋白 Recombinant Intercellular Adhesion Molecule 5 (ICAM5)
S100A2重组人 S100A2 蛋白 (Fc 标签) Protein
APOH Protein Human 重组人 Apolipoprotein H / APOH 蛋白 (His 标签)
EDA2R重组人 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) Protein
Recombinant Human PRKAB2HGF重组小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 标签) Protein
辅肌动蛋白α2(ACTN2)重组蛋白 Recombinant Actinin Alpha 2 (ACTN2)
ICAM4重组人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 标签) Protein
WFDC2 Protein Human 重组人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 标签)
IL1B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
上海博湖生物科技有限公司
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