文献支持Uox KO-Prolonged小鼠

服务名称 ：基因编辑/药物药效评价模型

提供商 ：赛业生物

Uox-KO (Prolonged) 小鼠

产品编号：C001393
品系背景：C57BL/6J
传代方案：杂合与杂合互配

品系描述：
尿酸氧化酶（Urate Oxidase，Uox）基因编码的尿酸酶（Uricase）在嘌呤代谢途径中有重要的作用，大多数哺乳动物体内含有UOX，可将嘌呤核苷酸的代谢产物尿酸分解成溶解度比尿酸高的尿囊素；而人体内缺乏UOX，嘌呤分解代谢只能生成尿酸，随后尿酸经肾脏排泄，导致人体内血尿酸的浓度高于其他哺乳动物。当尿酸生成速度超过肾脏的排泄能力时，血清尿酸水平会显著升高，造成高尿酸血症。UOX可以显著降低血清中的尿酸水平，并可以治疗由高尿酸血症继发引起的痛风和肾脏疾病等[1]。本模型为Uox基因敲除（Uox KO)小鼠，小鼠体内尿酸酶合成受阻，自发出现高尿酸血症表型。该品系杂合小鼠是可存活且可育的，纯合小鼠在出生后几周内可能出现部分死亡的情况，需要利用别嘌呤醇（Allopurinol）等药物维持其生存率。

构建方式：
Uox基因位于小鼠3号染色体上，利用CRISPR/Cas9打靶技术构建，敲除了该基因的3~4号外显子。


研究应用：

1、高尿酸血症研究；
2、痛风及其相关疾病研究；
3、其它代谢及肾脏疾病研究。

注意事项：
据文献报道Uox纯合缺失小鼠在出生后可能会出现陆续死亡的现象，Uox KO小鼠在出生后需用别嘌呤醇（Allopurinol）维持其生存[2]。

验证数据：

（1）生长曲线

图1. Uox KO小鼠与野生型小鼠体重检测。小鼠分组后每周测量小鼠体重，结果显示，Uox KO小鼠与野生型对照组（Control）小鼠的体重无明显差异，别嘌呤醇（Allopurinol）处理对Uox KO小鼠的体重无明显影响。


（2）生存曲线

图2. Uox KO小鼠与野生型小鼠的生存曲线对比。小鼠分组后每周监测小鼠生存状态，结果显示，与野生型对照组（Control）小鼠相比，Uox KO小鼠存活率在第5周降低至75%后保持不变；而别嘌呤醇（Allopurinol）处理的Uox KO小鼠存活率仅在第18周开始降低，第22周时存活率降低至66.67%。该结果表明，给予Uox KO小鼠别嘌呤醇可提高18周前的存活率。


（3）血生化指标

图3. Uox KO小鼠与野生型小鼠血生化分析。结果显示，与野生型对照组（Control）小鼠相比，Uox KO小鼠的尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）和尿酸（UA）含量均有不同程度的升高，呈现高尿酸血症特征。别嘌呤醇（Allopurinol）处理的Uox KO小鼠组尿素氮、肌酐、尿酸含量与未处理的Uox KO小鼠的总体变化趋势一致，表明别嘌呤醇在维持Uox KO小鼠存活率的同时并不会显著影响其尿素氮、肌酐和尿酸含量的变化。


（4）肾脏总体病理情况

图4. Uox KO小鼠与野生型小鼠肾脏外观形态变化。与野生型对照组（Control）小鼠相比，Uox KO小鼠的肾脏发生病变，存在明显的肾积水，别嘌呤醇（Allopurinol）处理的Uox KO小鼠同样也存在肾积水的表型。


（5）肾脏H&E染色

图5. Uox KO小鼠与野生型小鼠肾脏H&E染色结果。与野生型对照组（Control）小鼠相比，Uox KO小鼠的肾脏发生病变，外皮质存在蓝色病灶，别嘌呤醇（Allopurinol）处理的Uox KO小鼠也存在同样的病变表型。


（6）结果讨论
通过对Uox基因进行敲除，构建高尿酸血症疾病模型小鼠，并在饲喂别嘌呤醇后通过体重监测、生存监测、血生化检测和H&E染色对小鼠存活率、体征变化和病理表型进行分析与统计对比。表型检测结果显示，与野生型小鼠相比，Uox KO小鼠的存活率降低，尿素氮、肌酐和尿酸含量均有不同程度的升高。在Uox KO小鼠出生后一周内的饮水中添加100mg/L的别嘌呤醇后能够显著增加其在18周龄前的存活率，并保证其血生化指标与与未处理组大致维持在同一水平。该模型小鼠可用于后续的高尿酸血症疾病模型研究，为代谢疾病的研究提供强有效的工具。