Abmole M4839 CCK8试剂盒500T

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供应商 ：北京云肽生物科技有限公司

AbMole生物是世界领先的高品质生命科学产品供应商，主营细胞信号通路的高特异性小分子抑制剂、API、天然产物等生物活性分子，间充质干细胞细胞株、完全培养基，细胞培养服务。

我们北京云肽生物科技有限公司作为Abmole公司的特约经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准。

Abmole M4839 CCK8试剂盒500T，产品简介：
产品品牌：Abmole
产品货号：M4839
产品名称：CCK8试剂盒
英文名称：Cell Counting Kit-8
产品规格：500T

产品说明：
>Cell Counting Kit 简称CCK 试剂盒，为MTT 法的替代方法，是一种基于WST(水溶性四唑盐，
化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于
细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

>WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些
脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，
则颜色越浅。 对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。


CCK 法与MTT法之间的比较：

细胞计数方法	MTT法	CCK法
形成的formazan的水溶性	差	好
产品性质	粉末	溶液
使用方法	预先配置	无需预先配置
检测时间	>4小时	1~4小时
灵敏度	一般	灵敏度更高
检测波长	560~600nm	430~490nm
细胞毒性	高，细胞形态完全消失	低，细胞形态不变
试剂稳定性	一般	好
是否需要DMSO溶解	需要	不需要
便捷程度	一般	非常便捷

使用说明：
1、通常在96 孔板中，细胞增殖实验和细胞毒性实验分别接种细胞悬液(5000个细胞和2000个细胞/100μL/孔，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定)。设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。
2、细胞贴壁24小时后，按照实验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激。
3、药物处理2~4天，然后每孔加入10 μL 的CCK 溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD 值的读数)。
4、将培养板在培养箱内孵育1~4 小时，然后用酶标仪测定在450nm 处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 μL 0.1M 的HCL 溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24 小时内吸光度不会发生变化。
6、培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、 水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应， 所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测， 如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

活力计算：
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0 加药)-A(空白)] ×100
A(加药)：具有细胞、CCK 溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白)：具有培养基和CCK 溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药)：具有细胞、CCK 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

保存条件：4ºC避光保存一年有效， -20ºC避光保存两年有效。