免疫荧光（石蜡-单标）

提供商 ：星森林（浙江）生物医学技术有限公司

服务名称 ：免疫组化

免疫荧光
免疫荧光技术又称为荧光抗体技术，将荧光标记技术和免疫学方法结合起来，利用抗原抗体相互作用从而对组织或细胞内的 抗原或抗体物质进行定位、示踪、定性以及相对定量等。
实验意义 2.操作简便，便于推广。
实验步骤：
1.石蜡切片免疫荧光：
①烘箱内进行烘片，然后将切片进行常规脱蜡至水；
②抗原修复：使用水浴锅或电炉煮沸热修复，或者中档微波修复，缓冲液为0.01M柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）；
③去除内源性酶：3%H2O2室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性后，PBS清洗3次×3 min；
④封闭：5~10%正常血清封闭30 min；
⑤一抗孵育：稀释好的一抗4℃孵育过夜，PBS清洗3次×3 min；
⑥二抗孵育：将稀释好的带荧光标记的二抗，摇床缓慢孵育1 h，PBS清洗3次×3 min；
⑦DAPI复染核，PBS清洗3次×3 min；
⑧封片：Mounting Medium封片，凝固后拍照。（多重荧光染色：可使用绿色荧光、红色荧光和蓝色荧光进行三重荧光染 色）。
2.冰冻切片免疫荧光：
①新鲜组织经处理后，立即在恒冷冰冻切片机内切片，厚度为5~6 μm；
②防脱玻片，贴片，室温阴干约12 h；
③4℃纯丙.酮10 min处理，风干；
④PBS漂洗3次×10 min；
⑤0.3%Trion-100溶液37℃3次×10min； ④PBS漂洗3
次×5 min；
⑥去除内源性酶；封闭，一抗孵育、二抗孵育、复核染、封片等与石蜡切片的处理类似，同样也可做多重荧光染色。
结果展示
     
实验完成周期及交付标准

1. 实验周期：1-2周
2. 交付标准：蜡块、切片、荧光图片、半定量分析、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）
3. 需确认的信息 （1）.是做石蜡切片还是冰冻切片（推荐做石蜡切片） （2）. 样本的种属和类型，是组织还是细胞？
4. 样本的数量
5. 是否提供一抗，我方可代购
6. 半定量分析要求
7. 拍照要求