PEI线性转染试剂

价格： ￥300 - 1000

品牌：中科百抗

货号：BM350101

产品详情

产品信息

产品实验流程

以HEK293细胞为例：
1.转染前，确保细胞存活率大于95%，活细胞密度在(1.5~2.0)×10⁶ cells/mL之间；
2.将活细胞密度稀释至1.05×10⁶ cells/mL；
3.将pDNA和1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂颠倒数次，混匀；
4.每毫升待转染培养物转1 μg pDNA到一个干净的小瓶中。用新鲜培养基稀释至20 μg/mL（5%最终培养体积）。
5.每毫升待转染培养物转3 μL 1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂至干净的小瓶中。用培养基稀释至60 μg/mL(5%最终培养体积)。
6.将稀释的pDNA和Bestop™PEI线性转染试剂混合。颠倒几次，在室温下静置10分钟。使用前将密封的容器轻轻颠倒一次。
7.每90 mL培养基转染10 mL pDNA/PEI混合物。在混合的同时逐渐将混合物加入到培养基中，孵育细胞。
8.转染后：如果使用增强剂或补充剂，可以在转染后6小时的任何时间添加。传代培养也可以在6小时后进行。
如果使用GFP对照，48小时后应观察到转染率超过70%。对于优化过的方法，80%以上的转染率是合理的。
·特别提醒：初次使用PEI进行转染时，请先优化出适合自己实验的最佳DNA和PEI比例。