HPV16E7慢病毒

HPV16E7慢病毒

价格: ¥3980

品牌:wksubio

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库存 :大量

英文名 :HPV16E7 lentivirus

CAS号 :0000

保质期 :1年

供应商 :上海瓦兰生物

保存条件 :-20°

规格 :50ul

基因名称:HPV16E7
基因ID:1489079
大小:294bp
载体原件:Plenti-SFFV-HPV16E7-P2A- Puro
病毒包装:P1enti-SFFV-HPV16E7-P2A-Purc
包装规格:50ul/管
交付标准:病毒量:≥1X10'ru, 病毒滴度:≥1X 10°rU/mL, Puro抗性元件,约8-10管, 客户提供有效载体
荧光对照
基因名称:EGFP
载体原件:Plenti-SFFV-CoGFP-P2A-Puro
病毒包装:Plenti-SFFV-CoGFP-P2A-Puro 
包装规格:50ul/管
慢病毒感染快速指南
1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板,约 3-5×104细胞数/孔,不同细胞因为细胞大
小不同细胞数量会不同,快速指南以细胞数量为 5×104为例,加入 500uL 完全培养基进行
细胞培养。
2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒(接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长,否则细胞
增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选)。
3.加病毒量计算方法:(细胞数×MOI /病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量见下表。
同时加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,浓度为 10mg/mL Polybrene,细胞培养液中终浓度为
5ug/mL
病毒液滴度
TU/mL
MOI=10
uL
MOI=20
uL
MOI=40
uL
MOI=80
uL
MOI=100
uL
4×108TU/mL
1.25uL
2.5uL
5uL
10uL
12.5ul
4.感染 16-20h 后更换培养基,弃去培养基,每孔加入 500uL 新鲜的培养基。
5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。(注:如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%,请及时
传代培养)
6.建议将 48 孔板细胞进行传代,传代 12 孔板,后继续观察荧光,根据细胞状态和荧光细
胞比例综合判断细胞感染最佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好,感染效率 80%左右的感染
条件作为最佳感染条件。(注:100%荧光感染不一定为细胞最佳 MOI 值,因为可能会造成
细胞慢病毒感染拷贝数太高,影响细胞状态)
承接:基因修饰细胞(敲除、敲入、点突变)
病毒包装(慢病毒、非整合慢病毒、腺病毒、腺相关病毒)
基础实验服务(动物实验、载体构建、Seahorse能量代谢

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