产品详情
文献和实验
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库存 ：大量
英文名 ：Reduced Glutathione (GSH) Content Kit
CAS号 ：WS6020W
保质期 ：3个月
供应商 ：上海瓦兰生物
保存条件 ：4℃
规格 ：96T
本试剂盒仅供科研使用
还原型谷胱甘肽（reduced glutathione, GSH）含量试剂盒说明书
（货号：WS6020W 微板法 96 样）
一、产品简介：
还原型谷胱甘肽 GSH 是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运
输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值（GSH/GS SG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此，
测定细胞内 GSH 和 GS SG 含量以及 GSH/GS SG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
还原型谷胱甘肽 GSH 与 DTNB 与反应生成复合物，在 412nm 处有特征吸收峰；其吸光度与 GSH 含量
成正比。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 28mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 4mL×1 瓶
4℃保存
若凝固，可在 25℃水浴温育片刻
至全部融解后使用。
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲，则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、蒸馏水。
四、还原型谷胱甘肽（GSH）含量的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备
① 组织样本：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm 离
心 15min，取上清液，置冰上待测。
【注】：① 根据实验室条件，可先液氮研磨，再加提取液，进行冰浴匀浆
② 根据研究需求，可按组织质量（
g）：提取液体积(mL)为 1：10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
液；超声波破碎细菌或细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；4℃
×12000rpm 离心 15min，取上清液，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例
进行提取
③ 液体样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测
① 酶标仪预热 30min，调节波长到 412nm。
② 所有试剂在使用前需在 25℃水浴中保温 10min。
③ 在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（
μL）
测定管
对照管
样本
20
20
试剂一
120
160
试剂二
40
立即混匀，静置5min后，在412nm波长下分别读取吸光值A，
△A=A测定管﹣A对照管。本试剂盒仅供科研使用
2
【注】1. 若是同一批样本检测，样本对照管做一个即可。
2. 若△A 值在零附近徘徊，可以增加样本取样质量（如增至 0.2g）或加大上样量（如增
至 60μL，试剂一相应减少）。
五、结果计算：
1、标准曲线为 y=0.9676x+0.006；x 为标准品浓度（
μmol/mL），y 为ΔA。
2. 按蛋白浓度计算：
GSH(μmol/ mg prot)=[(△A-0.006)÷0.9676×V1]÷(V1×Cpr)=1.033×(△A-0.006)÷Cpr
3. 按样本鲜重计算：
GSH(μmol/g 鲜重)=[(△A-0.006)÷0.9676×V1]÷(W×V1÷V)=1.033×(△A-0.006)÷W
4. 按细胞数量计算：
GSH(μmol/104 cell)=[(△A-0.006)÷0.9676×V1]÷(细胞数量×V1÷V)
=1.033×(△A-0.006) ÷细胞数量
5. 按液体体积计算：
GSH(μmol/ mL)=[(△A-0.006)÷0.9676×V1]÷V1=1.033×(△A-0.006)
V----上清液总体积，1mL；
V1----加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02 mL；
W----样品质量，g；
Cpr----蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的蛋白含量检测试剂盒。
注意事项：上清液不能用于蛋白质浓度测定。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（1μmol/mL）：标准品溶于 4mL 蒸馏水中，（母液需在两天内用且
-20℃保存）。
2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. μmol/mL。也
可根据实际样本来调整标准品浓度。
3
依据测定管的加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。
上海瓦兰生物科技有限公司
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