双荧光素酶报告基因检测服务

前言

报告基因是现代分子生物学研究领域中用于潜在的顺式元件和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具，被广泛应用于基因表达调控、信号转导、启动子分析、受体功能鉴定、基因治疗以及药物筛选等领域。
荧光素酶是科研中运用最广泛的报告基因之一，其具有检测灵敏度高、结果重复性好、信噪比较高和易于检测等特点。

双荧光素酶基因报告系统（Dual-Luciferase reporter assay）

双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者可催化各自的底物发生氧化作用产生生物荧光，以萤火虫萤光素酶为核心reporter，海肾荧光素酶作为内参（内参根据双荧光载体的不同而有所不同，并非固定不变），构建研究对象到相应位置，转染细胞，裂解细胞，分别加荧光素酶底物，用荧光测定仪检测荧光强度，通过数据得出基因表达量，从而确定构建序列的功能。双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供基准线，从而可以在较大程度上减小细胞生长状况、细胞数目以及转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。

图1. 荧光素酶发光原理。（A）萤火虫荧光素酶催化反应原理；（B）海肾荧光素酶催化反应原理。

应用领域

1. 验证mRNA/lncRNA/circRNA与miRNA靶向互作;

2. 验证转录因子与启动子互相作用；

3. 验证转录因子结合位点；

4. 启动子结构分析或启动子SNP分析；

5. 诱导因素对启动子活性调节研究；

6. 研究分析信号通路是否激活。

优势

• 易表达：无需表达后修饰，直接具有可被检测的酶活；

• 高灵敏度：在所有的化学发光反应中，它的光产物具有最高的量子效率，因而非常灵敏。另外，在宿主细胞及检测试剂中均检测不到背景发光；

• 低背景：哺乳动物无内源性荧光素酶表达；

• 高效，通量大：检测快速，每个样品只需几秒钟；

• 与绿色荧光蛋白（GFP）不同，它们的发光检测不需要激发光激发，且发光穿透力更强。
  
   

  舒桐双荧光素酶报告基因检测服务优势

  
  (1) 载体库全，可根据客户不同实验需求构建报告检测重组载体；
  (2) 服务周期短，从载体构建、细胞转染、双荧光检测，整个流程20天内完成（可提供加急服务）；
  (3) 至少3个生物学重复，检测更可靠；
  (4) 提供原始数据和可视化结题报告。