产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 ：大量
英文名 ：H2S Content Determination Kit
CAS号 ：WS3310W
保质期 ：3个月
供应商 ：上海瓦兰生物
保存条件 ：4℃
规格 ：96T
本试剂盒仅供科研使用
H2S 含量测定试剂盒说明书
(货号：WS3310W 微板法 96 样)
一、产品简介：
H2S 被认为是细胞内第三种气体信号分子，在植物体内，参与植物生长发育、增强
生物以及非生物抗逆性，延缓植物衰老的多种生理过程。在动物体内，对神经系统有调
节作用，还可舒张血管平滑肌，降低血压。
在 Fe+3(作为氧化剂)存在的强酸性条件下，硫*氢与 N,N-二甲基对*二胺反应生成
蓝色的亚甲蓝，亚甲蓝在 665nm 处有最大吸收峰，故可根据亚甲蓝生成的量来计算植
物组织中的 H2S 的含量。
二、测试盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 2mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 2mL×1 瓶
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、天平、低温离心机、蒸馏水。
四、H2S 含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。12000rpm，4℃离心 10min，
取上清，置冰上待测。
【注】:若增加样本量，可按组织质量（
g）：提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液；
冰浴超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】:若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液体积(mL)为 500~1000:1 比例进行提取。
③ 液体样本：直接检测，若浑浊则离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min，调节波长至 665nm。
② 在 96 孔板中依次加入：
试剂名称（
μL）
测定管
空白管（仅做一次）
上清液
160
蒸馏水
160
试剂一
20
20
试剂二
20
20
混匀，室温（25℃）反应 15min，于 665nm 处读取吸光值
A，△A=A 测定-A 空白。
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y =7.6577x-0.0014，x 是标准品摩尔质量（
μmol），y 是△A。本试剂盒仅供科研使用
2
2、按照样本重量计算：
H2S(μmol/g 鲜重)=(△A+0.0014)÷7.6577÷(V1÷V×W)
=0.82×(△A+0.0014)÷W
3、按细胞/细菌数量计算：
H2S(μmol/104个)=(△A+0.0014)÷7.6577÷(V1÷V×细胞数量)
=0.82×(△A+0.0014)÷细胞数量
4、按照液体体积：
H2S(μmol/mL)=(△A+0.0014)÷V1=0.82×(△A+0.0014)
V---加入提取液体积，1mL； V1---反应中样品体积，0.16mL；
W----样品质量，g。
上海瓦兰生物科技有限公司
实名认证
金牌会员
入驻年限：11年
