文献支持超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法

库存 ：大量

英文名 ：Superoxide Dismutase (SOD) assay kit

保质期 ：3个月

供应商 ：瓦兰生物

保存条件 ：4℃

规格 ：48T/96T

超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒
（货号：WS1010F-1 分光法 48 样）
一、产品简介：
超氧化物歧化酶（SOD）（EC 1.15.1.1）在动植物、微生物和培养细胞体内广泛存在，
其具有抗衰老、提高机体对多种疾病的抵抗力，能增强机体对外界环境的适应力，是生
物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种 SOD 活性测定法，其中 NBT(氮蓝四唑)法产生的甲臜染料水溶性差，易和
被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到 100%等，从而使检测的灵敏度和
精确度受到影响；本试剂盒采用的是目前稳定性更好、灵敏度更高的 WST-8 法，WST-8
可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子(O2.- )反应产生
水溶性的甲臜染料，后者在 450nm 处有最大吸收；SOD 可清除 O2.-.，从而抑制甲臜的形
成；反应液颜色越深，说明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 16mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体μL×3 支
4℃保存
临用前离心或甩几下使试剂落入底部，每支
分别加 1.1 mL 蒸馏水充分溶解，-20℃保存。
试剂三
液体 1.5mL×1 支
4℃保存
试剂四
粉剂×5 支
4℃保存
临用前甩几下，使粉剂落到底部，每支加
0.1mL 试剂五振荡或超声 溶解 后，再 加
3.9mL 蒸馏水混匀使用（务必加 0.1mL 试剂
五溶解后再加水），一周内用完。
试剂五
液体 1mL×1 支
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、可调式移液器、研钵。
四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4ºC
或冰浴进行匀浆(或用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min，取上清作为待测液。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细
胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，
重复 30 次）；12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 450nm，蒸馏水调零。
② 测定前将试剂一、三和四 25℃水浴 5min 以上。