文献支持ATCC BEAS-2B细胞

英文名 ：BEAS-2B

库存 ：大量

供应商 ：北京百奥创新科技有限公司

细胞类型 ：上皮细胞

组织来源 ：肺;支气管

相关疾病 ：正常

物种来源 ：human

细胞形态 ：上皮细胞样

是否是肿瘤细胞 ：是

器官来源 ：肺;支气管

运输方式 ：干冰

生长状态 ：良好

ATCC BEAS-2B细胞

产品简介：
BEAS-2B 是从非癌性个体尸检中分离出来的正常人支气管上皮细胞。这些细胞保留了响应血清进行鳞状分化的能力，可用于筛选化学和生物制剂诱导或影响分化和/或致癌的能力。BEAS-2B细胞系是一种合适的转染宿主。
产品属性：
产品类别：人体细胞
生物：智人，人类
细胞类型：上皮细胞
细胞形态：上皮细胞样
组织：肺;支气管
疾病：正常
应用：3D细胞培养，高通量筛选，毒物学
产品格式：冷冻
储存条件：液氮
培养物检查
定期仔细观察培养物的形态和活力。检查容器中的介质是否存在微生物污染的宏观证据。这包括不寻常的pH值变化（由酚红变为黄色或紫色）、浊度或颗粒。此外，寻找漂浮在介质-空气界面的小真菌菌落。具体检查血管边缘周围，因为这些边缘可能不容易通过显微镜看到。
用低倍镜（40×）的倒置显微镜检查培养基是否有微生物污染和细胞形态的证据。细菌污染会在细胞之间的空间内表现为微小的、闪闪发光的黑点。酵母污染会表现为圆形或出芽的颗粒，而真菌会有细丝状菌丝。对于在烧瓶中生长的非粘附细胞，如杂交瘤，这是直接在显微镜上观察烧瓶的简单问题。对于在旋转瓶或生物反应器中生长的细胞，需要提取细胞悬浮液样本，并将其装载到显微镜载玻片或血细胞仪中进行观察。
Examination of cultures
Observe the morphology and viability of cultures regularly and carefully. Examine the medium in the vessel for macroscopic evidence of microbial contamination. This includes unusual pH shifts (yellow or purple color from the phenol red), turbidity, or particles. Also, look for small fungal colonies that float at the medium-air interface. Specifically check around the edges of the vessel as these may not be readily visible through the microscope.
With an inverted microscope at low power (40×), check the medium for evidence of microbial contamination and the morphology of the cells. Bacterial contamination will appear as small, shimmering black dots within the spaces between the cells. Yeast contamination will appear as rounded or budding particles, while fungi will have thin filamentous mycelia. For nonadherent cells grown in flasks, such as hybridomas, this is a simple matter of viewing the flask directly on the microscope. For cells grown in spinner flasks or bioreactors, a sample of the cell suspension will need to be withdrawn and loaded into a microscope slide or hemocytometer for observation.

产品信息：

细胞培养最看重的就是无菌操作，无菌操作是细胞培养是否成功的关键点。

1、使用前用75%的乙醇擦拭细胞间的桌面、超净台、孵箱和离心机等；紫外照射细胞间和超净台30分钟以上才可以进入使用。

2、进入细胞间必须穿上隔离服或者细胞间专用的白大衣，戴上手套和口罩，换上拖鞋，严格意义上来说，帽子也是要带的。除了隔离服，其他穿着物品最好一次性使用。

3、凡是放入超净台中的不是一次性使用的物品事先都需要经过高压灭菌；不能进行高压处理的物品也需要经过75%的乙醇消毒。包括酒精灯、吸管、移液器、试管架、培养皿、废液缸等。

4、操作过程中尽量接近酒精灯；用镊子拿取枪头、离心管、吸管等物品时，避免碰到使用端；不要在开口器皿的上端进行操作。

5、细胞间的设计都是一层层的隔间，每一层隔间的拉门都必须关好；当有人在超净台工作时，其他人员不允许进入操作区域。

细胞培养步骤
在进行细胞培养时，我们常用的仪器设备有：
无菌室,超净工作台,三重纯水蒸馏器,抽气泵,压力蒸气消毒器,电热恒温培养箱,培养器具，CO2培养箱,恒温水浴锅,倒置显微镜,离心机,无菌过滤器,洗刷装置,细胞计数板和电子细胞技术仪等等。
1.准备工作
准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。
2.取材
在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。
理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。
3.培养
将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。
正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。
原代培养一般有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。
4.冻存及复苏
为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。