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英文名 ：详见说明
库存 ：58
供应商 ：澳睿赛生物技术（上海）有限公司
肿瘤类型 ：详见说明
细胞类型 ：自发永生化细胞
ATCC Number ：详见说明
品系 ：详见说明
组织来源 ：颅骨
相关疾病 ：详见说明
物种来源 ：小鼠
免疫类型 ：详见说明
细胞形态 ：成纤维细胞样
是否是肿瘤细胞 ：详见说明
运输方式 ：常温/干冰运输
年限 ：详见说明
生长状态 ：贴壁细胞
规格 ：1×106Cells/T25培养瓶
MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞前体细胞
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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细胞别称
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MC3T3-E1
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商品货号
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ORC0650
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种属来源
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小鼠
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组织来源
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胚胎
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生长特性
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贴壁细胞
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细胞形态
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成纤维细胞样
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背景简介
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该细胞有多个亚克隆，可以作为体外研究成骨细胞分化的良好模型，尤其
是ECM信号通路的作用。
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生物安全等级
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1
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细胞规格
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1×10^6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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培养基
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a-MEM+10%FBS
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培养条件
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气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
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冻存条件
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无血清细胞冻存液
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倍增时间
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~12-25 hours
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传代比例
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1:2
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换液频率
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2~3次/周
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二、细胞培养操作
1)复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离
心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜
（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培
养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回
操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，
弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细
胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1.收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4.贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心 3 min，弃上 清。加 5mL PBS重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
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