保质期 ：1年

供应商 ：山东绿都

保存条件 ：-20

 快速DNA免核酸提取荧光PCR检测试剂盒

试剂盒简介：本试剂盒中采用独特配方，能够快速高效的裂解各种常见样本，无需液氮研磨，无需使用有机试剂，无需重复离心便可获得高质量的DNA。该DNA无需进行纯化可以直接用于PCR、荧光定量PCR、Lamp等扩增。本产品可用于各种植物（烟草、拟南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麦等）以及各种植物蛋白饮料中基因组DNA的提取。2×荧光PCR MIX 试剂中引入了dUTP/UDG防污染系统，可消除扩增污染对qPCR的影响。

试剂盒组成

组分	M-DNA01
DNA-Lysis	1 mL      （50T）
2×荧光 PCR MIX	500 μL    ( 50T )
样品稀释液	1.5ml×4  ( 50T )

保存期：-20ºC 保存，保存期一年。
注意：使用前将DNA-Lysis室温充分混匀。

准备的仪器：金属恒温浴、离心机、移液器、PCR仪

使用方法

• 不同样品的处理方法

（一）植物样品的处理
1. 叶片的处理
（1）用眼科剪或叶片取样器剪取1-4mm的叶片。
（2）加入20 μL DNA Lysis。
（3）充分混匀。
（4）置于55℃作用5分钟，加入100µL样品稀释液混匀，取1-2μL作为PCR反应模板。

2.种子和果实的处理
（1）研磨后种子或1-2mm果肉放入离心管中。
（2）加入20 μL DNA Lysis。
（3）充分混匀。
（4）置于55℃作用5分钟，加入100µL样品稀释液混匀。
（5）10,000rpm离心1分钟，取1-2μL作为PCR反应模板。
 

• 植物蛋白饮料样品的处理

（1）吸取20 μL DNA Lysis，放入离心管中。
（2）吸取10μL 待检测样品，加入（1）中，混匀。
（3）置于55℃作用5分钟后，加入100µL样品稀释液混匀。
（4）取1μL作为荧光PCR反应模板。


二、在DNase free 的离心管中配制PCR反应体系

PCR反应体系	20 μL体系（推荐）
2×荧光PCR MIX	10 μL
Forward Primer (10 μM)	0.4-1μL
Reverse Primer (10 μM)	0.4-1 μL
TaqMan Probe	0.4-1 μL
Template DNA	1 μL
ddH2O	补足至20 μL

三、反应程序

温度	时间	循环数
37ºC	2min	1
95ºC	2min	1
95ºC	10sec	40-45
60ºC	30sec

 

注意事项

（1）在进行大量样品检测时，可将本试剂盒的试剂预分装到8联 PCR管，用多通道移液器进行多样本的处理。
（2）取样的细胞量应当适中，浓度不宜过高或过低，处理后溶液应当以透明为宜。扩增细胞DNA 时，取2000个细胞以内即可；扩增病毒基因时需要根据病毒的滴度决定取样的细胞数量。
（3）样品处理过程中应当防止交叉污染，推荐设置阴性样品参与处理过程，以检测环境的污染。
（4）PCR的退火温度可根据引物的预测Tm值减去5℃，或者通过梯度PCR摸索最佳退火温度。
（5）用本试剂盒处理的样品可于-20℃保存 1个月。
（6）为防止试剂盒污染，请勿将不同批号试剂盒混用。


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