产品详情
文献和实验
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保存条件 :4℃
保质期 :12 个月
英文名 :Micro Exosome Total RNA Extraction Kit
库存 :充足
供应商 :武汉益普生物科技有限公司
CAS号 :详询
规格 :50T
Micro Exosome Total RNA Extraction Kit(外泌体总RNA提取试剂盒)
货号:WSR0004
规格:50T
产品组成
编号
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组分名称
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50T
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WZ03
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WisMag Exosome Beads(4℃保存)
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500mg |
WZ05
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Extraction Buffer(4℃保存)
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50mL |
WZ07
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Solution A(常温保存) | 2 × 125mL |
WZ08
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DEPC-treated Water(常温保存)
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550μL
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WSM0001
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1.5mL Nuclease-free Tubes(常温保存)
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50pcs
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贮存条件
WisMag Exosome Beads 和 Extraction Buffer 在 4℃下保存;其他在常温下保存;保质期 12 个月。
产品介绍
本试剂盒基于自研的能特异性结合外泌体的磁性颗粒,可快速提取各种生物流体样本中的外泌体总 RNA。
适用样本
本试剂盒最常用于血清、血浆样本,如果是脑脊液、唾液、胆汁、精浆等微量珍贵样本,请向本公司技术人员咨询样本预处理方法。
结果展示
自备仪器耗材试剂
高速冷冻离心机、侧摆摇床、水平摇床、冰盒(冰)、1.5mL 离心管(Nuclease-free)、磁力架或磁铁、氯仿、异丙醇、75%乙醇(用 RNase-Free ddH2O 配制)。
使用方法
1、血液(血清及血浆)样品预处理
1)去除细胞及细胞碎片。4℃,2000g,离心 30min,转移上清到新的 1.5mL 离心管;
2)去除大体积颗粒。步骤 1)得到的上清,4℃,14000g,离心 45min,转移上清到新的 1.5mL 离心管;维思克思生物科技(武汉)有限公司
2、富集外泌体
1)取经预处理后的样品 500μL(如果不足 500μL,可用 Solution A 补足)到 1.5mL离心管,加入 10mg(加入量±10%均可) WisMag Exosome Beads,离心管安置在侧摆摇床上,17rpm,室温旋转孵育 1h;或使用水平摇床,离心管水平放置在托盘上,固定,80rpm,室温振荡孵育 1h;
2)置于磁力架,静置 5s,弃上清;
3)加入 1mL Solution A,上下颠倒混匀,置于磁力架,静置 5s,弃上清;
4)重复上述步骤 3)4 次,保留沉淀;
3、外泌体 RNA 提取
1)向沉淀中,加入 1mL Extraction Buffer(主要成分为 Trizol,注意防护),冰上静置 5min;
2)加入 200μL 氯仿,盖紧管盖,剧烈振荡 15s,冰上静置 5min;
3)4℃,12000g,离心 15min;
4)离心后,样品分成三层(从上往下,分别是水相层、中间层、有机相层),将最上层的水相层转移至 1.5mL Nuclease-Free Tubes 中,加入 1mL 异丙醇,上下颠倒混匀,冰上静置 10min;
5)4℃,12000g,离心 10min,吸取上清并丢弃,保留沉淀;
6)向沉淀中,加入 1mL 75%乙醇,清洗沉淀;
7)4℃,12000g,离心 5min;吸取上清并丢弃,保留沉淀;
8)室温放置晾干。注意,不要晾的过干,完全干燥会很难溶解,大约 2-3min 即可;
9)向沉淀中,加入 11μL DEPC-treated Water,反复吹打混匀,充分溶解,-80℃冰箱保存备用。
注意事项
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 提取操作一定要在冰上进行。
3. RNA 提取所用到的耗材,都要预防 RNase 酶污染;所用到的配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。
4. 本试剂盒仅用于科学研究。
武汉益普生物科技有限公司
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