小麦叶疫病菌PCR检测试剂盒

文献支持小麦叶疫病菌PCR检测试剂盒

价格: ¥1990

品牌:XKbio

货号:XK-PCR3011

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库存 :100

英文名 :Alternaria triticin PCR Kit

CAS号 :/

保质期 :1年

供应商 :上海晅科生物科技有限公司

保存条件 :-20℃

规格 :50次

小麦叶疫病菌PCR检测试剂盒
英文名称:Alternaria triticin PCR Kit
小麦叶疫病菌学名为Alternaria triticina Prasada&Prabhu,英文名为leaf blight of wheat,它可以导致叶片病变坏死。小麦叶疫病在许多国家都是重要的检疫性病害,因此灵敏快捷地检测小麦叶疫病菌具有重要的意义。本产品就是为满足此需求而开发的、专门检测小麦叶疫病菌的PCR试剂盒。

 

产品特点:

1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板。
2.产品经过精心优化,分析灵敏性能到达 100拷贝/反应。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据小麦叶疫病菌DNA高度保守区设计,只能检测小麦叶疫病菌,不会跟除此之外的其他病菌的DNA发生交叉反应。
5.本产品足够50次20μL体系的PCR反应。
6.本产品只能用于定性实验,不能用于定量。
7.
本产品只能用于科研。

小麦叶疫病菌PCR检测试剂盒包装规格及成分:

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0 1 mL(红盖)

试剂二

超纯水 1 mL(亮黄色)

试剂三

小麦叶疫病菌 PCR 引物混合液 100 μL(白盖)

试剂四

小麦叶疫病菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 50 μL(黄盖)

试剂五

使用手册 1 份

运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

自备试剂:DNA 模板


 

使用方法:

一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 小麦叶疫病菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照
PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
小麦叶疫病菌 PCR 引物 混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL    
PCR 阴性对照(水)   18 μL  
PCR 阳性对照(小麦叶疫病菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)     18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程 温度 时间
预变性 95℃ 5 min
PCR 反应 (35 个循环) 95℃ 30 sec
55℃ 30 sec
72℃ 30 sec
最后延伸 72℃ 7 min


三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。


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