产品详情
文献和实验
相关推荐
提供商 :蓝景科信
服务名称 :RNA Pull Down技术服务
RNA pull down是体外研究RNA与蛋白互作的重要技术。该技术是用生物素标记体外转录的靶RNA分子,再用链霉亲和素纯化出与靶RNA结合的蛋白复合体,洗脱得到RNA结合蛋白质。再通过Western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与靶RNA结合;或通过质谱仪检测可以筛选出与靶RNA结合的蛋白。
生物素与链霉亲和素间的作用,是目前已知强度最高的非共价作用。其中,活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此,用生物素标记核酸后,可以纯化出与该核酸结合的各种生物大分子复合物。
实验流程
- 探针设计及标记:体外转录或合成获取RNA,生物素标记;
- pull-down:与细胞裂解液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素磁珠结合,从而把靶RNA结合蛋白从细胞裂解液中分离出来,经过洗涤将非特异性结合蛋白质去除;最后,洗脱得到与靶RNA结合的蛋白质复合物;
- 互作蛋白质鉴定:再经过Western Blot或质谱(MS)鉴定蛋白质。
服务内容
-
体外转录或合成RNA,生物素标记;
-
细胞培养与细胞裂解液制备;
-
pull-down捕获互作蛋白;
-
Western blot验证特定的蛋白;
-
MS鉴定潜在的互作蛋白。
蓝景科信河北生物科技有限公司
代理商实名认证
钻石会员
入驻年限:2年