文献支持SILu?MAB 稳定同位素标记的通用单克隆抗体标准品 人SIGMA:MSQC6-100UG

说明

应用

SILu™ MAB K1稳定同位素标记通用单克隆抗体已用于掺入多肽样品，分析制备重现性。

特点和优势

通用肽序列定位

FNWYVDGVEVHNAK重链（IgG1）

VVSVLTVLHQDWLNGK 重链（IgG1、IgG3、IgG4）

GFYPSDIAVEWESNGQPENNYK 重链（IgG1、IgG4）

SGTASVVCLLNNFYPR 轻链(κ)

VDNALQSGNSQESVTEQDSK 轻链(κ)

DSTYSLSSTLTLSK 轻链(κ)

 

SILu™Mab已通过基于MRM的LC-MS/MS分析被验证为复杂生物基质中相关生物治疗药物定量的内标。

SILu™Mab产生0.1 μg/mL至1000 μg/mL的可重复线性曲线，无需对目标样品进行富集或剔除纯化。

在同一目标衍生的多个肽之间观察到良好的一致性。

通过质谱确定标记掺入率>98%。

通过肽图谱确认序列覆盖。

外形

以含有磷酸盐缓冲盐水的冻干粉形式提供

制备说明

SILu™Mab 通用抗体标准品专门优化用作单克隆抗体及Fc融合蛋白药物的定量分析内标。由于与候选抗体在Fc区的通用序列重叠，SILu™Mab具有通用性，从而无需生产候选抗体特异性内标。

利用含有稳定同位素标记氨基酸的富集培养基生产的是13C₆、15N₄标记的精氨酸和13C₆、15N₂标记的赖氨酸。

重悬

当使用 0.1％ 的甲酸重悬冻干产品时，SILuMab 的回收率最高。 用其他溶剂重悬可能会降低回收率。重悬后不要冷冻。

程序

将小瓶以约 10,000 x g 的速度短暂离心，在小瓶底部收集产品。

向小瓶中加入500 μL含0.1%甲酸的纯水。

轻轻颠倒样品瓶至少 5 次 混合内容物。

让小瓶在室温下静置至少 15 分钟，然后颠倒重复混匀。

分析说明

SILuMAb K1重链

 

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCVASGFTLNNYDMHWVRQGIGKGLEWVSKIGTAGDRYYAGSVKGRFTISRENAKDSLYLQMNSLRVGDAAVYYCARGAGRWAPLGAFDIWGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

 

SILuMAb K1轻链

 

QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIYDATKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCCSYAGDYTPGVVFGGGTKLTVLTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

 

靶标重叠区域加了下划线

根据A280 使用 1.4 的消光系数（E0.1%）测定的蛋白质含量确定包装规格

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