GPAAV-EF1a-DIO-hChR2(E123A)-EYFP AAV particles光遗传

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英文名 ：AAV particles

供应商 ：吉满/Genomeditech

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规格 ：AAV2/8 _ 50μl*4管

功能基因： ChR2(E123A)-EYFP
基因类型： 光遗传
产品描述： 使用EF1启动子，可用CRE诱导表达hChR2(E123A)-EYFP
规格：AAV2/8 _ 50μl*4管(1E13 VG/ml)
 

载体信息
元件顺序	GPAAV-Ef1a-DIO-hChR2(E123A)-EYFP
启动子	EF1α
表达方式	CRE-Loxp
载体荧光	YFP
真核抗性	N/A
工具类型	腺相关病毒颗粒
产品用途	过表达

pAAV-EF1a-DIO-hChR2(E123A)-EYFP启动子为哺乳动物细胞广泛表达启动子，ChR2来源于单细胞蓝藻（chlamydomonas reinhardtii）中的一种感光蛋白，是一种光敏感电压依赖性的非选择性阳离子通道蛋白（channelrhodopsin-2），含737个氨基酸，有7个跨膜区域，其中第1、2、3、7跨膜区为导电孔，从而在细胞膜上形成阳离子通道。

当表达ChR2的细胞受到蓝光照射时，通道开放，迅速引发离子流触发可兴奋细胞去极化。无光照时，可迅速失活。具有快速激活和失活的动力学特性。ChR2激发波长为350～550nm，中心激活波长为470nm。对阳离子的选择强度依次为H+、Na+、K+、Ca2+，介导的电流呈内向整流特性，反转电位为0mV，其大小与光源在单位面积的辐照度（irradiance）正相关。

目前存在两种ChR2序列，野生型(ChR2)和哺乳动物密码子优化型(hChR2)。另有多种突变型蛋白可实现多种功能。hChR2(E123A)是将第123位氨基酸谷氨酸突变为丙氨酸，受到蓝光照射时,通道开放,导致细胞去极化，该突变型蛋白质具有4 ms快速的通道开关速度。hChR2(H134R)是将第134位氨基酸组胺酸突变为精胺酸，该蛋白质在受到蓝光照射时可以产生两倍的光电流，但通道开关速度也比野生的ChR2慢了一倍。hChR2(E123T/T159C)是将第123位氨基酸谷氨酸突变为苏氨酸，将159位氨基酸苏氨酸突变为半胱氨酸，该蛋白质在受到蓝光照射时具有更大的光电流和更快的动力学变化。ChETA是ChR2突变体(E123T/H134R)的简称，此突变蛋白可以使神经元在光刺激下释放200Hz的尖峰，而其他的ChR2通道蛋白只能达到40Hz，同时还能快速从失活状态恢复，并改善了在持续激发下的电信号稳定性。

hChR2(E123A)融合黄色荧光（EYFP）可有效的标记蛋白位置。DIO是依赖于CRE的双floxed颠倒定向结构，在无CRE情况下，不表达蛋白。在CRE存在下，将原本倒置的编码框转置为正向编码框，使蛋白正常表达。

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