2 × Ezmax-Multi CloneMix Plus

库存 ：999

英文名 ：2 × Ezmax-Multi CloneMix Plus

供应商 ：圻明生物

保存条件 ：-20°

1、产品简介

Ezmax® “一步法快速克隆试剂盒”可用于无缝克隆外源 DNA 片段：简单、快速、 高效。该方法不依赖于任何限制性内切酶，可将任何外源 DNA 片段定向克隆至任意载体的任意位 点（特殊情况，如有毒基因的克隆或插入外源 DNA 后导致质粒本身不稳定等除外）。因此，在基 因克隆、DNA 拼接和 DNA 定点突变等领域有广泛用途。

2、产品组成

组分    24310-01
(25rxn)    24310-02
(50rxn)    24310-03
(250rxn)
2 × Ezmax-Multi CloneMix Plus    250μL    500μL    5 × 24310-02
Control(1:4):4-kb vector+0.5-kb×2+0.4-kb+0.8-kb insert
(50ng/μL)    5μL    5μL
注：阳性对照载体为 Amp 抗性。

3、产品保存

本产品应置于-20 °C 储存，并在使用时注意保持低温（如置于冰上）。

4、使用说明

4.1 制备线性化载体

在靶标载体上选择合适的克隆位点，对克隆载体进行线性化处理。如果可以选择的话，建议尽量 选择无重复序列、无高级结构且 GC 含量在 40%~65%之间的区域用于外源 DNA 的克隆。常用的载 体线性化方法包括：限制性内切酶酶切和设计反向引物进行 PCR 扩增制备。

4.2 酶切法制备线性化克隆载体

如果有合适的酶切位点，建议使用该方法，整个操作流程也比较简单。其中，双酶切比单酶切更 好。酶切后，可以取少量酶切产物进行电泳，以确保全部载体被切开。对于绝大部分酶，可以对 酶切产物进行 65 °C 高温 20 min 灭活，然后直接用于后续无缝拼接反应，而无需对酶切的载体进行 胶回收或过柱回收等处理。