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文献和实验
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库存 :999
英文名 :2 × Ezmax-Single CloneMix Plus
供应商 :圻明生物
保存条件 :-20°
1、产品简介Ezmax®“一步法快速克隆试剂盒”可用于无缝克隆外源 DNA 片段:简单、快速、 高效。该方法不依赖于任何限制性内切酶,可将任何外源 DNA 片段定向克隆至任意载体的任意位 点(特殊情况,如有毒基因的克隆或插入外源 DNA 后导致质粒本身不稳定等除外)。因此,在基因克隆、DNA 拼接和 DNA 定点突变等领域有广泛用途。
2、产品组成
组分 24309-01
(25rxn) 24309-02
(50rxn) 24309-03
(250rxn)
2×Ezmax-Single CloneMixPlus 250μL 500μL 5×24309-02
Control(1:1):4-kb vector+2.2-kb insert
(50ng/μL) 5μL 5μL
注:阳性对照载体为 Amp 抗性。
3、产品保存
本产品应置于-20 °C 储存,并在使用时注意保持低温(如置于冰上)。
4、使用说明
4.1 制备线性化载体
在靶标载体上选择合适的克隆位点,对克隆载体进行线性化处理。如果可以选择的话,建议尽量 选择无重复序列、无高级结构且 GC 含量在 40%~65%之间的区域用于外源 DNA 的克隆。常用的载 体线性化方法包括:限制性内切酶酶切和设计反向引物进行 PCR 扩增制备。
4.2 酶切法制备线性化克隆载体
如果有合适的酶切位点,建议使用该方法,整个操作流程也比较简单。其中,双酶切比单酶切更 好。酶切后,可以取少量酶切产物进行电泳,以确保全部载体被切开。对于绝大部分酶,可以对 酶切产物进行 65° C 高温 20 min 灭活,然后直接用于后续无缝拼接反应,而无需对酶切的载体进行 胶回收或过柱回收等处理。
上海圻明生物科技有限公司
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