dCas9

库存 ：999

英文名 ：dCas9

供应商 ：圻明生物

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产品简介

来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链 DNA（在 DNA PAM 存在的情况下，也可以切割单链 DNA 或单链 RNA）。Cas9 切割位点位于目标序列 （target sequence）内，离 PAM（NGG）区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA（sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA），整个体系，包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中，Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非配对的链。在本产品中，Cas9 的 H840 和 D10 都被突变为 A，使 Cas9 的 HNH 和 RuvC 结构域均失活，获得 dCas9 蛋白。因此，dCas9 只有结合靶标 DNA 的活性，而没有切割靶标 DNA 的活性。

产品组成

产品货号    32102-01    32102-03
dCas9    100pmol(1pmol/μL)    1000pmol(10pmol/μL)
10×TOLO Buffer3    1mL    1mL×2
推荐反应体系（20 μL）：

组分    体积
10×TOLO Buffer3    2µL
250nM sgRNA    2µL
1pmol/µL dCas9    1µL
30nM substrate DNA    2µL
Nuclease-free water up to    20µL
37°C培养30min至1h，然后通过非变性核酸电泳等方法对实验结果进行检测