LwaCas13a (LwaC2c2)

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英文名 ：LwaCas13a (LwaC2c2)

供应商 ：圻明生物

保存条件 ：-20°

产品简介

Cas13a核酸酶（又名 C2c2）是依赖于 RNA 介导的 RNA 内切核酸酶。在靶标单链 RNA 存在 PFS序 列的情况下，可特异地切割靶标 RNA。此外，Cas13a 还具有依赖于靶标单链 RNA 的反式切割活性 （即，旁路切割活性），可用于开发靶标核酸的快速检测试剂盒。例如，MIT 的张锋团队便利用 Cas13a 蛋白开发了名为“SHERLOCK”的下一代分子诊断系统。相比公司自主开发的依赖于 Cas12 的 HOLMES系统，SHERLOCK 所使用的 Cas13a 蛋白识别靶标 RNA 并反式切割 RNA报告探 针。一般来说，RNA 报告探针的两端分别为荧光基因和淬灭基团标记，其在被 Cas13a 切碎之后便 可以发出可被检测的荧光。类似地，可以在 RNA 报告探针的两端分别标记上 FITC（/FAM）和 Biotin，然后结合胶体金试纸条进行快速、便捷地检测。公司提供的 Cas13a 蛋白及反应缓冲液不含任何除 Cas13a 外的任何其它核酸酶活性。

产品组成

产品货号    32117-01    32117-03
LwaCas13a Nuclease(10pmol/μL)    100pmol(10μL)    1000pmol(100μL)
10×Cas13 Buffer    1mL    1mL×2
Control Target RNA(100nM)    5μL    5μL
Control crRNA(500nM)    5μL    5μL
ssRNA reporter (FAM-BHQ1)(1µM)    5μL    5μL
注：Target RNA，crRNA 以及 ssRNA reporter 应保存于-80 °C 以防止降解；购买本产品并不代表获得相关 CRISPR 分子诊断的专利授权！

推荐反式反应体系（20 μL）：

组分    体积
10×Cas13 Buffer    2µL
500nM crRNA    2µL
10µM Lwa Cas13a Nuclease    0.5µL
100nM Target RNA    2µL
1µM ssRNA reporter    2.5µL
Nuclease-free water up to    20µL
在冰水浴上混合后，利用荧光定量PCR仪或荧光酶标仪进行检
测。Control中的ssRNA reporter为FAM荧光标记。