产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :现货
英文名 :Exonuclease III (100 U/μL)
CAS号 :点击查看
保质期 :2年
供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司
保存条件 :-20度
规格 :2,500 U
产品描述
Exonuclease III作用于双链 DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在DNA分子群内产生渐进式3’端缺失。尽管可以作用于双链DNA的切刻产生单链缺口,但该酶最适底物是平齐末端或3’凹陷末端DNA。由于对单链DNA无活性,因此该酶无法切割3’突出末端,其3’→5’外切酶活性对底物的切割程度随3’突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割。
Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。温度、盐浓度和酶与 DNA的比例对酶活性影响很大,应根据不同的反应调整反应条件。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。
产品组分
产品应用
1. 链特异性探针的制备;
2. 制备用于双脱氧测序的单链底物;
3. RPA扩增中荧光探针的降解,释放荧光信号;
4. 双链DNA的非定向巢式缺失。
单位定义
1 U指在37℃条件下,30 min内催化生成1 nmol酸可溶性总核苷酸所需的酶量。
酶保存液成分
200 mM KCl,5 mM KPO4,5 mM β-ME,0.05 mM EDTA,200 µg/mL BSA,50% Glycerol,pH 6.5@25℃。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年,避免反复冻融。
Exonuclease III作用于双链 DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在DNA分子群内产生渐进式3’端缺失。尽管可以作用于双链DNA的切刻产生单链缺口,但该酶最适底物是平齐末端或3’凹陷末端DNA。由于对单链DNA无活性,因此该酶无法切割3’突出末端,其3’→5’外切酶活性对底物的切割程度随3’突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割。
Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。温度、盐浓度和酶与 DNA的比例对酶活性影响很大,应根据不同的反应调整反应条件。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。
产品组分
编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
14525ES86 (2,500 U) | 14525ES93 (12,500 U) | ||
14525-A | Exonuclease III (100 U/μL) | 25 μL | 125 μL |
14525-B | 10× AM Buffer A | 0.5 mL | 1.5 mL |
产品应用
1. 链特异性探针的制备;
2. 制备用于双脱氧测序的单链底物;
3. RPA扩增中荧光探针的降解,释放荧光信号;
4. 双链DNA的非定向巢式缺失。
单位定义
1 U指在37℃条件下,30 min内催化生成1 nmol酸可溶性总核苷酸所需的酶量。
酶保存液成分
200 mM KCl,5 mM KPO4,5 mM β-ME,0.05 mM EDTA,200 µg/mL BSA,50% Glycerol,pH 6.5@25℃。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年,避免反复冻融。
注意事项
1. Exonuclease III不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割;
2. 本产品仅做科研用途;
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
应用实例-酶切反应
1. 反应体系配制:
组分 | 体积 (μL) |
10× AM Buffer A | 5 |
平末端或5’突出端(3’凹陷末端)DNA | 2~5 μg |
Exonuclease III (100 U/μL) | 1 |
ddH2O | to 50 |
3. 75°C加热10 min,使酶失活;
4. 电泳检测双链DNA水解结果。
HB221024
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
品牌商实名认证
钻石会员
入驻年限:17年