SR-FLICA Caspase-3/7 检测试剂盒检测半胱天冬酶 3 和 7 的活性

库存 ：大量

英文名 ：SR FLICA Caspase 3 and 7 Assay Kit

CAS号 ：SR FLICA Caspase 3 and 7 Assay Kit

保质期 ：1年

供应商 ：齐源生物

保存条件 ：2-8℃

规格 ：25Tests/100Tests

SR-FLICA Caspase-3/7 检测试剂盒检测半胱天冬酶 3 和 7 的活性详细如下：
SR-FLICA Caspase-3/7 检测试剂盒检测半胱天冬酶 3 和 7 的活性。这种体外测定采用荧光抑制剂探针 SR-DEVD-FMK 来标记活细胞中的活性半胱天冬酶 3 和 7。使用荧光显微镜、荧光板阅读器或流式细胞仪分析荧光信号。
FLICA 检测试剂盒被研究人员用来通过培养细胞和组织中的半胱天冬酶活性来定量细胞凋亡。FLICA 试剂 SR-DEVD-FMK 进入每个细胞并不可逆地结合激活的半胱天冬酶 3 和 7。由于 SR-DEVD-FMK FLICA 试剂与活性酶共价偶联，它保留在细胞内，而任何未结合的 SR- DEVD-FMK FLICA 试剂扩散出细胞并被冲走。剩余的红色荧光信号是对添加试剂时细胞中存在的半胱天冬酶 3 和 7 酶活性的直接测量。包含结合的 FLICA 的细胞可以通过荧光读板器、荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。用 FLICA 试剂标记的细胞可以立即读取或使用固定剂保存 16 小时。未固定的样品也可以用 Hoechst 33342 进行分析，以检测核形态的变化。
试剂名称    ：SR-DEVD-FMK
目标           ：Caspase-3/7
激发/发射   ：550-580 纳米 / 590-600 纳米
分析方法    ：流式细胞仪、荧光显微镜、荧光酶标仪
样本类型    ：细胞培养
贮存           ：2-8℃
操作步骤：
1.准备样品和对照。
2.用 diH2O 按 1:10 稀释细胞凋亡洗涤缓冲液。
3.用 50 µL DMSO 重构 FLICA。
4.通过添加 200 μL PBS 稀释 FLICA 1:5。
5.在 1:30 – 1:60 时将稀释的 FLICA 添加到每个样品中。例如，要在 1:30 染色，将 10 µL 添加到 290 µL 的培养细胞中。要以 1:60 进行染色，请将 5 µL 添加到 295 µL 的培养细胞中。
6.孵育约 1 小时。
7.去除培养基并洗涤细胞 3 次：加入 1X 细胞凋亡洗涤缓冲液并离心细胞。
8.如果需要，用其他染色剂标记，例如 Hoechst、7-AAD 或抗体。
9.如果需要，修复或嵌入细胞。
10.使用荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪进行分析。SR-FLICA 在 550-580 nm 激发并在 590-600 nm 发射。