0.1ml 96孔PCR板-半裙边，白色，无酶，无热源（罗氏480专用）

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供应商 ：上海白益生物科技有限公司

现货状态 ：2-3周

保修期 ：详询

规格 ：10块/盒,5盒/箱

"生物耗材

裂解液的制备

A. 制备细胞裂解液：

①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用PBS清洗。

②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min（每500000个细胞20μl RIPA缓冲液）。

③10000rpm，4℃离心10min，取上清转移至新管。

④用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。

⑤用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml,每小瓶中放100μl，-80℃储存。

⑥按照1:1体积比混合2×样品缓冲液，煮沸5min后，室温放置5min.

⑦短时离心后点样电泳检测。

B． 制备组织裂解液：

①在制备过程中一直将溶胞液或组织放在冰上。

②切开组织，称取组织1.5g于PBS中清洗。

③在RIPA缓冲液中剪碎组织后，转移到匀浆器中，加足5ml RIPA缓冲液，研磨20min.

④将研磨液转移到1.5ml的离心管中，14000rpm，4℃离心10min.

⑤取上清液作为完整的组织裂解液。

⑥用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度。

⑦用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml，每小瓶中放100μl，-80℃储存。

⑧按照1:1体积比混合2×样品缓冲液，煮沸5min后，室温放置5min.

⑨短时离心后点样电泳检测。

RIPA裂解液
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液，获得的蛋白样品可用于常规WB、IP等实验。

组分：25 mM Tris-HCl, pH 7.6、150 mM NaCl、1% NP-40、1%去氧胆酸钠、0.1%十二烷基硫酸钠（SDS）。

IP裂解液
IP裂解液是一种改良后的RIPA裂解液，具中等强度效力，可高效溶解细胞蛋白，但不会像RIPA一样释放染色体组DNA或破坏蛋白复合物。适合下游免疫沉淀或亲和吸附应用。

组分：25 mM Tris-HCl, pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、1% mM EDTA、5% 甘油。

NP-40裂解液
NP-40裂解液是一种很温和的非离子型去垢剂，与蛋白结合力强，尤其适用于膜蛋白非变性条件下的溶解。

组分：50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM氯化钠、1％NP-40；加蛋白酶抑制剂：抑肽酶、亮肽素、胃抑素，每种1μg / ml；使用前立即添加1mM PMSF。

Tris-Triton裂解液
Tris-Triton裂解液是非离子型表面活性剂，效力介于NP-40和SDS之间，下游应用有WB、ELISA、IP。

组分：10mM，pH值7.4、100mM NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1% Triton X-100、10% 甘油、0.1% SDS、0.5% 去氧胆酸钠。