海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒

保存条件 ：保存在-80℃

保质期 ：-

英文名 ：Renilla Luciferase Assay Kit

库存 ：现货

供应商 ：爱必信(absin)

CAS号 ：-

规格 ：50T/200T/1000T

概述
描述	真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测，生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化，并发射出光子。该产品为海肾萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。 产品特点: 1、快速：细胞裂解在 10-15 min 内完成。 2、方便：试剂易于配制，样品检测步骤简单。 产品组分： 序号 名称 50T 200T 1000T A 5×Renilla Luciferase Lysis Buffer 5ml 20ml 100ml B Renilla Luciferase Assay Buffer 5ml 20ml 100ml C  50×Coelenterazine 100ul 400ul 2×1ml
使用方法	1、细胞裂解 （1）将培养基移除，加 PBS 轻轻洗涤（贴壁细胞可直接进行此操作，悬浮细胞要离心收集细胞）。按如下方案加入 1×Lysis Buffer(用无菌水按 4:1 稀释 A 组分)，然后将培养板放在微型震荡器上室温震荡 15 min，充分裂解细胞。 细胞培养板 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板 裂解液体积 30ul 60ul 120ul 250ul 500ul 注：裂解产物可室温保存 6 h，-70℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。 （2）将充分裂解后的裂解产物，10000-15000 rpm 离心 3-5 min，离心后将上清液移入新的 EP 管中进行后续检测。 2、工作液配制 （1）将所有组分恢复至室温。 （2）用组分B将组分C稀释成海肾萤光素酶工作液，稀释方法为将1ul C组分加入到 49 µL B 组分中。 3. 化学发光值检测 （1）按照仪器操作说明书开启具有检测化学发光功能的仪器，如多功能酶标仪，设定参数，测定时间为 10 s，测定间隔为2 s。 （2）将细胞裂解产物按照 20~100 ul 的体积加入测量管中（保持每次样品量一致）。1×Lysis Buffer 为空白对照。 （3）加入 100 ul 海肾萤光素酶工作液，测定 RLU（Relative light unit）值（建议酶标仪设置 Shaking 混匀功能）。 注：海肾萤光素酶工作液不能长时间保存，现用现配，一次性使用完毕。
性能
储存/保存方法	-80℃保存。B 组分建议根据实验需求进行小批量分装。海肾检测工作液建议现配现用，避免反复冻融。
注意事项	1、使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。 2、由于温度对酶反应有影响，所以测定时，样品和试剂均需达到室温后再进行测定。 3、海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为 480 nm，为防止孔间干扰，建议使用白色不透光孔板。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。