细胞焦亡/半胱天冬酶-1 检测试剂盒绿色

库存 ：大量

英文名 ：细胞焦亡/半胱天冬酶-1 检测试剂盒绿色

CAS号 ：细胞焦亡/半胱天冬酶-1 检测试剂盒绿色

保质期 ：详见说明

供应商 ：齐源生物

保存条件 ：2-8℃

规格 ：25Tests/100Tests

细胞焦亡/半胱天冬酶-1 检测试剂盒绿色详细如下：
焦亡细胞中的 caspase-1 活性，并利用尼日利亚菌素作为阳性对照。FLICA 试剂 FAM-YVAD-FMK 进入每个细胞并不可逆地与激活的 caspase-1 结合。由于 FAM-YVAD-FMK FLICA 试剂与活性酶共价偶联，它保留在细胞内，而任何未结合的 FAM-YVAD-FMK 试剂扩散出细胞并被洗掉。剩余的绿色荧光信号是对添加试剂时细胞中存在的活性 caspase-1 酶活性的直接测量。包含结合的 FLICA 的细胞可以通过荧光板读取器、荧光显微镜或流式细胞术进行分析。用 FLICA 试剂标记的细胞可以立即读取或使用固定剂保存 24 小时。未固定的样品也可以用碘化丙啶、7-AAD 或 Hoechst（包含在试剂盒中）进行复染。Nigericin 诱导细胞内钾水平的净降低，这对 caspase-1 的激活至关重要。在细胞焦亡实验中，尼日利亚菌素可用作阳性对照，在多种细胞系中产生强大的 caspase-1 激活反应。或 Hoechst（包含在套件中）。Nigericin 诱导细胞内钾水平的净降低，这对 caspase-1 的激活至关重要。在细胞焦亡实验中，尼日利亚菌素可用作阳性对照，在多种细胞系中产生强大的 caspase-1 激活反应。或 Hoechst（包含在套件中）。Nigericin 诱导细胞内钾水平的净降低，这对 caspase-1 的激活至关重要。在细胞焦亡实验中，尼日利亚菌素可用作阳性对照，在多种细胞系中产生强大的 caspase-1 激活反应。
试剂名称    FAM-YVAD-FMK
目标    胱天蛋白酶1
激发/发射    488 纳米 / 530 纳米
分析方法    流式细胞仪、荧光显微镜、荧光酶标仪
样本类型    细胞培养，组织
贮存    尼日利亚菌素在 ≤ -20°C 其他成分在 2-8°C
操作步骤：
1.准备样品和对照。
2.用 diH2O 按 1:10 稀释 10X 细胞检测缓冲液。
3.用 50 µL DMSO 重构 FAM-FLICA。
4.通过添加 200 μL PBS 稀释 FAM-FLICA 1：5。
5.在 1:30-1:60 时将稀释的 FAM-FLICA 添加到每个样品中（例如，通过将 10 µL 添加到 290 µL 样品，在 1:30 加标）。
6.孵育约 1 小时。
7.去除培养基并洗涤细胞 3 次：添加 1X 细胞洗涤缓冲液并旋转细胞。
8.如果需要，用其他染色剂标记，例如 Hoechst 33342、碘化丙锭、7-AAD 或抗体。
9.如果需要，修复细胞。
10.使用荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪进行分析。FAM-FLICA 在 492 nm 激发并在 520 nm 发射。