流式单B细胞分选平台

提供商 ：北京义翘神州科技股份有限公司

服务名称 ：流式单B细胞分选平台

单个B细胞抗体制备技术是近年来新发展的一类快速制备单克隆抗体的技术，是根据每一个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列，以及每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性，从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性B细胞，通过单细胞PCR技术从单个抗体分泌B细胞中扩增IgG重链和轻链可变区基因，然后在哺乳动物细胞内表达并获得具有生物活性的单克隆抗体。

流式单B细胞分选的技术路线

义翘神州的流式单B细胞分选平台，是从免疫小鼠的脾或者兔子外周血和脾中用流式来分选抗原特异性的单个B细胞。分选后的单细胞有两种处理方式，一种方法是直接裂解细胞进行基因扩增，通过义翘神州自主研发的单B细胞扩增技术，可以实现单B细胞较高的配对成功率。直接裂解扩增单B细胞的方法可以最大限度地得到阳性克隆，但因为没有早期的介入筛选，会给后续操作增加工作量。另一种处理方式是将分选的单细胞先在体外培养扩增，然后将细胞培养的上清进行ELISA或者FACS等前期介入检测，再挑选检测的阳性细胞克隆扩增其抗体可变区基因，最后进行抗体的重组表达和验证。

流式单B细胞筛选服务套餐一览
 

小鼠单B细胞流式分选服务
周期：8-10周 (不包括免疫)
快速免疫15天，常规免疫7-11周
高通量流式分选抗原特异性B细胞
对接鼠单抗人源化改造

兔单B细胞流式分选服务
周期：8-10周 (不包括免疫)
快速免疫33天，常规免疫7-9周
高通量流式分选抗原特异性B细胞
上清提前介入筛选，保证筛选效率
抗体的亲和力达到10⁻¹⁰–10⁻¹²M

磷酸化兔单抗流式分选服务
周期：8-10周 (不包括免疫)
周期快
磷酸化抗体制备的常选方法
兔B细胞产生的抗体多样性和特异性好，亲和力高
 

流式单B细胞抗体开发的案例分享

案例1：免疫检查点TIM-3抗体筛选
流式分选B细胞平台能够在短时间内获得天然配对的轻重链可变区，且基因多样性更丰富，难点在于单个细胞RNA易降解、PCR模板量低等。义翘神州通过自主研发的流式单B细胞平台筛选TIM-3抗体，最终成功获得5株与阳性对照抗体的细胞活性相当、亲和力相近的目标抗体。 案例2：激动剂抗体OX40筛选
OX40（又名TNFRSF4，CD134）是T细胞的共刺激分子，其主要在激活的CD4+和CD8+T细胞上有较高表达。义翘神州通过流式B细胞筛选平台，在该平台无激动剂靶点筛选经验的前提下，针对靶点OX40筛选获得细胞活性和亲和力水平与阳性对照抗体相当，因子释放实验优于对照抗体的候选分子，具体检测数据如下所示。
 

单个B细胞发现平台的不同应用

基础研究

除常规的免疫检测抗体外，单B细胞平台还可用于筛选如磷酸化、甲基化、乙酰化等翻译后修饰抗体，可为科研客户提供特异性结合翻译后修饰位点的单克隆抗体。
 
北京义翘神州科技股份有限公司（简称：义翘神州，品牌：Sino Biological）于2021年8月16日成功登陆深圳证券交易所创业板（股票代码：301047），是一家从事生物试剂研发、生产、销售并提供技术服务的生物科技公司，主要业务包括重组蛋白、抗体、基因和培养基等产品，以及重组蛋白、抗体的开发和生物分析检测等服务。
义翘神州为全球的药品研发企业和生命科学研究机构提供高质量的生物试剂产品和高水平的技术服务，能够覆盖生命科学研究的多个领域，为分子生物学、细胞生物学、免疫学、发育生物学、干细胞研究等基础科研方向和创新药物研发提供“一站式”生物试剂产品和技术服务。客户涵盖大学、科研院所、医药研发企业等国内外各类生物研发单位。目前公司已经在美国、欧洲等地建立了子公司，在上海建立分公司，已成为生物试剂行业国内领先的科技公司之一。
凭借多年病毒蛋白研究技术优势，义翘神州仅用11天就成功表达出新冠病毒重要靶点受体结合域蛋白。为了更好的支持新冠病毒研究，义翘神州已开发生产近百种新冠病毒相关科研试剂，包括重要靶点抗原蛋白、中和抗体、抗原蛋白检测试剂盒等。义翘神州还可以提供新冠假病毒中和检测服务，可用于筛选出具有中和活性的抗体或血清，支持在细胞水平上的评估。目前，这些科研试剂已被全球数百家研究机构用于疫苗和抗体开发及基础机制研究。