BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶

规格 ：10KU

反转录（Reverse Transcription）是以RNA为模板，在反转录酶的催化作用下，合成RNA/DNA杂合双链，然后水解杂合双链中的RNA，得到互补的单链cDNA的过程。得到的cDNA单链可以作为扩增模板合成双链DNA。cDNA的合成可以用与后续的PCR实验、qPCR实验、基因检测、基因工程等各个领域。
其中反转录酶的选择对后续实验至关重要，经过改造和优化，碧云天推出了特别适合后续qPCR实验的高精确度BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶。BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能够以RNA或DNA为模板，在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成，即可以进行cDNA的第一链合成。同时本反转录酶还保留了RNase H活性，能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA，有利于后续cDNA第二链的合成。
采用本反转录酶，碧云天生产了BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒，试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂，使用简单方便快捷。

产品特点：
检测灵敏度高：和其它反转录酶相比，本产品的反转录产物用于qPCR时，CT值通常能下降1-2左右，使用本产品能获得更好的检测灵敏度，可以使用更少的样品；
扩增速度快：使用本产品时，仅需反转录5-10分钟，即可以用于后续的qPCR，可以大幅缩短实验时间。
反转录性能优，扩增特异性强，反应稳定性好

产品用途：
1. 总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成，特别适合用于常规RNA样品的反转录和qPCR检测或一步法qRT-PCR检测，也非常适合于內源低丰度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的反转录及后续的qPCR检测；
2. 反转录产物也适合用于常规PCR、cDNA的第二链合成、cDNA文库构建、克隆；
3. DNA探针的荧光、生物素、地·高·辛·或同位素标记；
4. 通过引物延伸(primer extension)分析和研究RNA。

产品效果：

图1.BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶对总RNA进行反转录后用于qPCR检测的效果图。从HEK293T细胞抽提获得的总RNA 2µg，在20μl反转录体系(2µg Total RNA, 0.5μg Oligo(dT)18 primer, 0.2μg Random Hexamer primer, 1X Reaction Buffer, 20U RNase Inhibitor, dNTP Mix (1mM each), 200U BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶)中进行反转录，反转录后取1μl (100%)或不同稀释比例(1μl的10%、1%、0.1%、0.01%)反转录产物进行GAPDH cDNA 151bp目的片段的qPCR扩增和电泳检测。A.扩增曲线图。B.溶解曲线图。C.qPCR扩增产物的电泳图。NTC (no-template control)，用水代替反转录产物。qPCR反应体系20µl，使用碧云天生产的D7260 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X)。实际检测效果会和特定实验条件有关，图中结果仅供参考。

图2.使用BeyoRT™ Q cDNA第一链合成试剂盒对总RNA反转录后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见本产品可以轻松完成长度为8 kb以下基因的反转录，反转录的最大长度可以达到12 kb。图中的扩增效果仅供参考。

小编贴心为大家整理了碧云天不同反转录酶的特点，大家可根据实验需求进行选择哦~

产品编号	反转录酶名称	扩增长度	RNaseH活性	高速反转录活性	耐热性	cDNA克隆	qPCR
D7153	BeyoRT™ M-MuLV反转录酶	13kb	有	无，建议反转录60分钟	有，耐受42℃-50℃	★★★★	★★
D7159 D7166	BeyoRT™ M-MuLV反转录酶(RNase H-)	13kb	无	无，建议反转录60分钟	有， 42-45℃最佳，耐受55℃	★★★★	★★
D7160 D7168 D7170	BeyoRT™II M-MLV反转录酶(RNase H-)	>10kb	无	无，建议反转录60分钟	有， 42-45℃最佳，耐受50℃	★★★★	★★
D7176 D7178 D7180 D7182 D7185	BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-)	12kb	无	有，小于3kb建议反转录10分钟	有， 42℃最佳，耐受50-55℃	★★★★★	★★★
D7188 D7190	BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶	>3kb	有	有，建议反转录5-10分钟	无，42℃最佳	★★	★★★★★

选择指南：
1. 如果反转录后的用途是qPCR，最.优先推荐选购D7188 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶。对于待检测的目的RNA的丰度比较高的时候，可以适当优先考虑BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-)，通常仅需反转录10分钟即可用于qPCR，也可以大幅缩短实验时间。
2. 如果希望克隆一个目的基因，最,优先推荐BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-)，该酶不仅能反转录长达12kb的RNA，并且具有快速反转录能力，小于3kb的目的基因仅需反转录10分钟，可以大幅缩短实验时间。用于克隆目的基因时，BeyoRT™II M-MLV反转录酶(RNase H-)、BeyoRT™ M-MuLV反转录酶和BeyoRT™ M-MuLV反转录酶(RNase H-)也是比较好的选择。