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文献和实验
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保存条件 :室温(10-30℃)保存,消化液请于-20℃存放;有效期1年
保质期 :1年
英文名 :-
库存 :现货
供应商 :爱必信(上海)生物科技有限公司
CAS号 :-
规格 :100T/50T
产品描述 | |
描述 | 产品介绍: 该产品是专为从粪便中提取基因组RNA而设计,适用于不同来源的固态或液态粪便样本。它采用了新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。 产品特点 1. 操作简便快速,粪便预处理后,可在15分钟内完成操作; 2. 提取RNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.8-2.0; 3. 产率高,同样的样本量提取的RNA更多。 |
使用方法 | 操作步骤: 1. 请自行准备:无水乙醇、异丙醇、PBS、1.5mLRNase-free灭菌离心管。 2. 取出洗涤液,按以下操作: a) 洗涤液A:21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。 b) 洗涤液B:18mL加入42mL无水乙醇;36mL加入84mL无水乙醇,混匀。 c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。 3. 取200mg的粪便于1.5mL RNase-free灭菌离心管中 (若粪便样本为液态,取200μL于离心管中),加入1mL PBS充分振荡混匀,300g离心5分钟,收集上清。取收集的上清液0.9mL于1.5mL RNase-free灭菌离心管中,12000 rpm离心5分钟,弃0.8mL上清,振荡重悬剩余沉淀和液体。 a) 对于革兰氏阴性菌和一般的革兰氏阳性菌、肠道脱落细胞,直接进行步骤4操作; b) 对于细菌壁较厚的革兰氏阳性菌、真菌、细菌芽孢等须首先进行破壁处理,可将上述沉淀用少许液氮反复研磨3次,再进行步骤4操作。 4. 加入200 μL 裂解液, 20μL消化液,充分振荡混匀,65℃水浴10 分钟。 5. 加入150μL异丙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。 6. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液全部转入吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 7. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液A至吸附柱内,静置1分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 8. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 9. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 10. 按每份样本40μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取400μL 洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。 11. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 分钟,离去残留的洗涤液。 12. 取出吸附柱,放入新的1.5mL RNase-free灭菌离心管内,在吸附柱中心加入40 μL预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 4℃离心1分钟,收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-70℃保存。 |
储存/保存方法 | 室温(10-30℃)保存,消化液请于-20℃存放;有效期1年 |
爱必信(上海)生物科技有限公司
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