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文献和实验
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保存条件 :室温(10-30℃)保存,消化液请于-20℃存放;有效期1年
保质期 :1年
英文名 :-
库存 :现货
供应商 :爱必信(上海)生物科技有限公司
CAS号 :-
规格 :100T/50T
产品描述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
描述 | 产品介绍: 这款产品专门用于血液RNA的提取纯化,他是在综合比较了国外同类优质产品的基础上反复研制优化而成的。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的血液中提取高质量的基因组RNA,也可以直接提取得到血液中感染的微生物或转移的肿瘤细胞RNA,省去了一般血液RNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤,操作简便快速,只需20分钟左右即可完成血液RNA提取,并且RNA提取得率较高,可在200 μl 血液中提取2-5ug左右基因组RNA。它采用了新的优质离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR等。 产品特点: 1、操作简便快速,20分钟左右可获得理想的RNA; 2、提取RNA纯度高,无抑制剂,1.7 3、产量更高,较国内同类产品高出20%; 4、样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的血液样本。 |
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使用方法 | 操作步骤 (请自行准备无水乙醇、异丙醇、1.5mLRNase-free 灭菌离心管): 1、 取出洗涤液,按以下操作:
2、 取 1.5mLRNase-free 灭菌离心管,加入 200μL 血液样本,再加入 180μL 裂解液、 3μL 消化液A和20μl消化液B,振荡混匀,65℃水浴 10 分钟。 3、 加入 400μL 异丙醇,混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响 RNA 的提取与后续实验。 4、 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液; 5、 (可选步骤,去除DNA) 取RNase-free 离心管1只,每份需去除DNA的提取样本分别加入10x DNase I Buffer 6μL、RNase-free ddH2O 52μL 、 RNase-free DNase I 2μL,轻轻手振混匀,勿剧烈震荡。用移液器在每份提取样本的吸附膜中央加入 60μL 上述配制好的 DNase I 反应液, 室温放置 15min,参见RNase-free DNase I 试剂盒。 6、 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 A 至吸附柱内,静置 1 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。 7、 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 B 至吸附柱内,静置 1 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。 8、 将吸附柱放回收集管内,加 500μL 洗涤液 B 至吸附柱内,12,000 rpm 离心 1 分钟,弃收集管内废液。 9、 按每份样本 40μL 取洗脱液(如 10 份提取样本,即取 400μL 洗脱液),放置于灭菌 1.5mL 离心管,65℃预热。 10、 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心 2 分钟,离去残留的洗涤液。 11、 取出吸附柱,放入新的 1.5mL RNase-free 灭菌离心管内,在吸附柱中心加入 40 μL 预热洗脱液,静置 2 分钟,12,000 rpm 离心 1 分钟, 收集 RNA 溶液。提取的 RNA 即可用于下一步实验或-70℃保存。
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储存/保存方法 | 室温(10-30℃)保存,消化液请于-20℃存放;有效期1年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
技术指标 | 试剂盒组成:
注:该试剂组成于2022年11月21日更新 |
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注意事项 | 1.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。洗涤液加入乙醇后要充分混匀,最好现用现配,每次根据所要提取的样本量计算后适量配制。 2.如血液量不足200μL,请用0.85% 生理盐水补至200μL;如血液量超出200μL,请使用中大量血液RNA提取试剂(货号:abs60282)。 3.如果提取的血液为鸟类、禽类的血液,因有核红细胞较多,提取血液量应适当减少,研究者应先进行优化实验,选择合适用量。 4.为防RNA酶污染,实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩,使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水。 5.提取的RNA如暂不使用,应-70℃保存,可适当加入RNA保护因子(货号:abs60280,一般40μLRNA溶液加入2μL)。 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染 |
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