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文献和实验
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保存条件 :-20℃保存,有效期12个月。
保质期 :12个月
英文名 :2× Xerox PCR Master Mix
库存 :现货
供应商 :爱必信(上海)生物科技有限公司
CAS号 :-
规格 :1ml×5/1ml
公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!
产品描述: 产品名称:2× Xerox PCR Master Mix 描述: 储存/保存方法: -20℃保存,有效期12个月。 技术指标:
2.高复杂基因组模板,50 μl 反应体系中,DNA 模板的使用量应该在 100-500 ng,如果扩增的片段较长,最好用琼脂糖电泳检测 DNA的完整性。DNA 的完整性越好,长距离 PCR 的成功率越高。 3.cDNA 模板的添加量不要超过 PCR 反应体系的 1/10,50 μl PCR 反应体系中 RT 产物的加入量为 2-3μl,不要超过 5μl。
结果检测: PCR 反应结束后,5-10μl 扩增产物用含 0.5μg/ml 溴化乙锭(或合适浓度的其它 DNA 染色试剂),合适浓度的琼脂糖凝胶电泳检测,电泳完成后在紫外透射仪下观察并记录结果。 产品用途: 高保真PCR快速扩增;复杂模板的DNA扩增;长距离PCR;血液直接PCR扩增 注意事项: Xerox DNA 聚合酶具有的很高热稳定性,可以用 98℃预变性,对于大多数模板而言,98℃预变性 1 min 就足够了,预变性不要超出 3 min。当然也可以按照常规方法使用 94℃变性 2-5 min。血液直接扩增时,预变性可设置 95℃ 10 min,让细胞裂解并释放DNA。 在循环扩增时,98℃变性持续时间可以设定 5-10sec,简单模板 5sec,复杂模板 10sec。 一般条件下,可以采用如上表所列的三温度梯度循环的 PCR 扩增方法,引物的退火温度为两条引物中较低 Tm-5,引物的退火持续时间可以设定 10-20 sec。当两条引物的 Tm 值都大于等于 70℃时,而且都使用了长引物,可以使用两步法来扩增,两步法中退火温度和延伸温度都为 72℃。 Xerox DNA 聚合酶的最佳延伸温度是 72℃。延伸所需要的时间依赖于扩增产物的长度和复杂度。对于质粒,BAC 这类 简单模板,可以使用 15 sec/kb 延伸速度,对于高复杂性的基因组 DNA,可以使用 30sec/kb 延伸速度。扩增 1kb 以下的产物时,延伸时间不要超过 40 sec。 absin,您身边的科研百宝箱 |
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