人脑胶质瘤细胞（永生化）丨人脑胶质瘤丨逸漠(immocell)

品系 ：人源细胞株

ATCC Number ：详询

细胞类型 ：上皮细胞样

肿瘤类型 ：详询

CAS号 ：详询

供应商 ：IMMOCELL

库存 ：9999

注册证号 ：详询

英文名 ：人脑胶质瘤细胞

生长状态 ：贴壁生长

年限 ：详询

运输方式 ：顺丰快递

器官来源 ：脑

是否是肿瘤细胞 ：详询

细胞形态 ：上皮细胞样

免疫类型 ：详询

物种来源 ：人源细胞株

相关疾病 ：详询

组织来源 ：脑

人脑胶质瘤细胞(永生化)

产品基本信息

细胞名称：人脑胶质瘤细胞(永生化)

种属来源：人

组织来源：脑

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基:：DMEM+10%FBS+PS

生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

传代方法：1:2至1:3，每周 2-3次

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

支原体检测：无

重要提醒：该细胞比较难消化，且消化后贴壁时间较长，因此传代处理后24-48h内尽量不要移动，防止影响贴壁，该细胞易聚团成斑块状生长，生长非常缓慢，属正常现象，保持营养充足即可。

培养瓶中的培养基是不含药物的，待细胞状态良好，稳定生长时，可以用含加含15nM的吉西他滨药物培养基处理48h，期间若有部分细胞悬浮起来，属于正常情况，通过换液去掉即可。冻存时请不要在培养基中加药物。

细胞培养操作

1)复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x106~1x107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。