猪白介素13（IL-13）

供应商 ：上海白益生物科技有限公司

库存 ：999

样本 ：血清，血浆，唾液，尿液，组织，细胞上清，裂解液等

标记物 ：elisa试剂盒

适应物种 ：人，小鼠，大鼠，植物，鱼，虾，蟹，牛，羊，狗，猫，微生物，细胞，土壤等动植物

应用 ：科研实验

检测方法 ：酶联免疫法

检测限 ：详询

规格 ：96T/48T

试剂盒

（1）　包被缓冲液（PH9.60.05M碳酸盐缓冲液）:

Na2CO3 1.59克

NaHCO3　 2.93克

加蒸馏水至1000ml

（2）　洗涤缓冲液（PH7.4PBS）：0.15M

KH2PO4 　0.2克

Na2HPO4·12H2O　2.9克

NaCl　8.0克

KCl　0.2克

Tween-20　0.05%　0.5ml

加蒸馏水至1000ml

（3）　稀释液：

牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

加洗涤缓冲液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。

（4）　终止液：

蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸（98%）21.7ml。

（5）　底物缓冲液（PH5.0磷酸枣柠檬酸）:

0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml

0.1M柠檬酸（19.2克/L）　 24.3ml

加蒸馏水50ml。

（6）　TMB使用液:

TMB（10mg/5ml无水乙醇）0.5ml

底物缓冲液（PH5.5）　 10ml

0.75%H2O2　 　32μl

（7）　ABTS使用液:

ABTS　0.5mg

底物缓冲液（PH5.5）　 1ml

3%H2O2　 　2μl

（8）　抗原、抗体和酶标记抗体。

（9）　正常人血清和阳性对照血清。

器材

（1）　聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。

（2）　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。

（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。

试验原理

试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

5． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。