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文献和实验
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库存 ：详询
英文名 ：Exosome Isolation Kit (from cell culture media for NTA/TEM) (EZB-exo201)
CAS号 ：详询
保质期 ：详询
供应商 ：北京百奥创新科技有限公司
保存条件 ：详询
规格 ：具体价格请联系我们
产品介绍EZBioscience® Exosome Isolation Kit（来自用于 NTA/TEM 的细胞培养基）提供了一种简单、可靠和快速的方法，用于从细胞培养基、尿液、支气管肺泡灌洗液 (BALF)、脑-脊髓液 (CSF) 样本，无需超速离心。 外泌体是含有 RNA 和蛋白质的小囊泡（30-120 nm），由培养中的各种细胞分泌，在血液、唾液、尿液和母乳等体液中大量存在。据报道，外泌体作为细胞间信使发挥作用，在特定细胞之间传递效应物或信号大分子；然而，它们的形成、货物的组成以及它们所涉及的生物途径仍不清楚。 外泌体分离试剂盒（来自细胞培养基）提供了一种从细胞培养基样品中浓缩完整外泌体的简单可靠的方法。通过水分子，外泌体 沉淀试剂将难溶性成分（即外泌体）从溶液中挤出，从而可以通过短暂且相对低速的离心来收集它们。 然后通过纯化柱 (0.22 μm) 纯化重悬的外泌体。 之后，外泌体可用于RNA纯化（用于RNA测序、RNA芯片、RT-qPCR）、蛋白质提取、粒度检测和电子显微镜等。
实验程序
准则
a) 为确保分离的外泌体来源于您的目标细胞，请使用去除外泌体的胎牛血清 (FBS) 或无血清培养基培养细胞，因为正常的 FBS 含有极高水平的外泌体，会污染细胞衍生的外泌体。如果您无法获得去除外泌体的 FBS，某些细胞系可以在不含 FBS 的培养基中生长长达 12 小时。
b) 不推荐使用外泌体沉淀试剂 (EPR) 从其他类型的样品中分离外泌体。如果您要从血浆中分离完整的外泌体，请使用 Total Exosome Isolation (from plasma) 试剂。
准备样品
1. 收集5~20 ml细胞培养基（或尿液、支气管肺泡灌洗液、脑脊液）。
2. 将血浆样品在 4°C 下以 3000 × g 离心 10 分钟以去除细胞和碎片。
3. 将含有无细胞培养基的上清液转移到新试管中，不要干扰沉淀。
分离外泌体
1. 将所需体积的无细胞培养基转移到新试管中，加入 1/4 体积的外泌体沉淀试剂 (EPR)。
2. 通过涡旋或倒置试管充分混合培养基/试剂混合物，直至溶液均匀。 将样品在 2 ~ 8°C 下孵育过夜。
3. 孵育后，将样品在 4°C 下以 10000 × g 离心 30 分钟。
4. 用移液器小心吸出上清液并弃去上清液。 外泌体包含在试管底部的颗粒中（在大多数情况下不可见）。
重悬外泌体
1. 向沉淀中加入 1× PBS 或类似缓冲液，上下涡旋或移液器重悬外泌体。
注意
纯化后的外泌体样品可保存在 2 ~ 8°C 长达 7 天，或可在 -80°C 以下长期储存。 为了最大限度地降低 RNase 污染的风险，我们建议直接进行进一步的下游样品处理。
a) 为确保分离的外泌体来源于您的目标细胞，请使用去除外泌体的胎牛血清 (FBS) 或无血清培养基培养细胞，因为正常的 FBS 含有极高水平的外泌体，会污染细胞衍生的外泌体。如果您无法获得去除外泌体的 FBS，某些细胞系可以在不含 FBS 的培养基中生长长达 12 小时。
b) 不推荐使用外泌体沉淀试剂 (EPR) 从其他类型的样品中分离外泌体。如果您要从血浆中分离完整的外泌体，请使用 Total Exosome Isolation (from plasma) 试剂。
准备样品
1. 收集5~20 ml细胞培养基（或尿液、支气管肺泡灌洗液、脑脊液）。
2. 将血浆样品在 4°C 下以 3000 × g 离心 10 分钟以去除细胞和碎片。
3. 将含有无细胞培养基的上清液转移到新试管中，不要干扰沉淀。
分离外泌体
1. 将所需体积的无细胞培养基转移到新试管中，加入 1/4 体积的外泌体沉淀试剂 (EPR)。
| Culture Media |
Reagent |
| 5 ml |
1.25 ml |
| 20 ml |
5 ml |
3. 孵育后，将样品在 4°C 下以 10000 × g 离心 30 分钟。
4. 用移液器小心吸出上清液并弃去上清液。 外泌体包含在试管底部的颗粒中（在大多数情况下不可见）。
重悬外泌体
1. 向沉淀中加入 1× PBS 或类似缓冲液，上下涡旋或移液器重悬外泌体。
| Starting Culture MediaVolume |
Resuspension Volume |
| 1 ml |
30 µl |
| 10 ml |
60 µl |
注意
纯化后的外泌体样品可保存在 2 ~ 8°C 长达 7 天，或可在 -80°C 以下长期储存。 为了最大限度地降低 RNase 污染的风险，我们建议直接进行进一步的下游样品处理。
北京百奥创新代理 EZBioscience在中国的业务。
北京百奥创新科技有限公司：
一、辐射五大服务方向：
国内试剂耗材经销代理；国外试剂订购（直订或境外代理）；基因组测序（二代、二代+三代）；基因分型（SNP检测）：低/中/高通量项目；生物样本运输；
二、多家授权代理品牌，涉及30多种，经营代理500多个品牌：
EZBioscience、Intact Genomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific......
所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷门品牌，价格优，货期短，可加急。大部分客户我们提供货到付款服务，百奥创新自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。
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了解更多详情，请点击http://www.bestbaiao.com/或拨打电话：4008883135
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二、多家授权代理品牌，涉及30多种，经营代理500多个品牌：
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