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文献和实验
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保存条件 :低温保存
保质期 :6个月
英文名 :GPX测试盒
库存 :487
供应商 :江西江蓝纯生物有限公司
规格 :50管/48样
中文名称:谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测试盒测定方法:分光光度法
测定规格:50管/48样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
GSH-Px是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应,生成氧化型谷胱甘肽GSSG,从而保护生物膜免受ROS的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
测定原理:
GSH-Px催化有机过氧化物氧化GSH,产生GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化NADPH还原GSSG,再生GSH,同时NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 混合试剂在25℃或者37℃(哺乳动物)水浴中预热30min。
3. 混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一40 mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀。(注意:必须现配现用,当天使用完)
4.试剂四的稀释: 吸取21.5μL试剂四,加入5mL水充分混匀,临用前配制,配制的试剂当天使用。
5. 测定管:依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的混合试剂、100μL稀释后的试剂四, 迅速混匀后于340nm处测定第30 s和第210s的吸光值,分别记为A1和A2,△A= A1﹣A2。
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
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