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文献和实验
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保存条件 :低温保存
保质期 :6个月
英文名 :LDH测试盒
库存 :468
供应商 :江西江蓝纯生物有限公司
规格 :50管/24样
中文名称:乳酸脱氢酶(LDH)测试盒测定方法:分光光度法
测定规格:50管/24样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。
测定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成酮酸,酮酸进一步与2, 4 - 二硝基肼作用生成酮酸二硝基腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与酮酸浓度成正比。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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