γ谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)检测试剂盒_江蓝纯生物供应(微量法)

保存条件 ：低温保存

保质期 ：6个月

英文名 ：GCL含量测试盒

库存 ：145

供应商 ：江西江蓝纯生物有限公司

规格 ：100T/96S

中文名称：γ谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)检测试剂盒
测定方法：微量法
测定规格：100T/96S
保存条件：低温避光保存

测定意义：
GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 对 GCL 有反馈抑制作用。GCL基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。



测定原理：
在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。

自备仪器和用品：
冷冻离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、浓硫酸和蒸馏水。

粗酶液提取： 
1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清等液体：直接测定。

注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。