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文献和实验
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供应商 :上海晶抗生物工程有限公司
库存 :386
样本 :来电咨询
标记物 :详见说明书
适应物种 :来电咨询
应用 :仅供科研研究使用
检测方法 :微量法
规格 :100管/48样
酸性木聚糖酶(ACX)测试盒_微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
储存条件:低温保存
注 意 :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅,可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体90mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。(若出现白色絮状或颗粒状沉淀,可60℃加热溶解后使用)。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm。
2、操作表
对照管 | 测定管 | |
样品(μL) | 60 | |
灭活的样品(μL) (95℃水浴15min) |
60 | |
缓冲液(μL) | 90 | 90 |
试剂一(μL) | 60 | 60 |
混匀,50℃水浴中反应30min,立即沸水浴中10min灭活。(注意不要让盖子爆开,以免进水,改变了反应体系) | ||
试剂二(μL) | 90 | 90 |
混匀,沸水浴显色5min,取200µL于微量石英比色皿/96孔板中540nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 |
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