肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒_微量法

供应商 ：上海晶抗生物工程有限公司

库存 ：430

样本 ：来电咨询

标记物 ：详见说明书

适应物种 ：来电咨询

应用 ：仅供科研研究使用

检测方法 ：微量法

规格 ：100管/96样

肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶A将酰基转移至L-肉毒碱的反应，在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。                         

测定原理：
基于肉碱和脂酰辅酶A在丙二酰辅酶A存在与否的条件下，通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用，产生脂酰肉碱，并释放出巯基辅酶A(COA-SH)，与Ellman试剂DN-TB反应后，产生的TNB。通过其吸收峰值得变化（412nm），来定量分析CPT-1的活性。

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水

试剂组成和配制：
试剂一：液体100mL×1瓶，-20℃保存；
试剂二：液体20mL×1瓶，-20℃保存；
试剂三：液体1.5mL×1支，-20℃保存；
试剂四：液体30mL×1瓶，4℃保存；
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存；
试剂六：粉剂×1支，-20℃保存；




测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。
2、样本测定
（1）在试剂五中加入1mL无水乙醇，混匀，再加入22mL试剂四，混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；

（2）在试剂六中加入1mL蒸馏水，混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
（3）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、220μL试剂五和10μL试剂六，混匀，记录412nm处20秒时的初始吸光度A1和2分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。