游离脂肪酸含量(FFA)测试盒/测血清/动物组织/微生物/细胞_微量法

供应商 ：上海晶抗生物工程有限公司

库存 ：449

样本 ：来电咨询

标记物 ：详见说明书

适应物种 ：来电咨询

应用 ：仅供科研研究使用

检测方法 ：微量法

检测限 ：20 nmol/mL

规格 ：100管/96样

游离脂肪酸含量(FFA)测试盒/测血清/动物组织/微生物/细胞_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
游离脂肪酸，也称为非酯化脂肪酸，在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。

测定原理：
用有机溶剂萃取FFA。在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA一Cu。Cu离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与Cu离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律，因此可利用此反应进行比色。

自备的仪器和用品：
酶标仪、离心机、可调式移液器、96孔板、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
萃取液：液体 120 mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体 15 mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体 15 mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，室温保存；
试剂四：液体 12 mL×1瓶，4℃保存；





测定步骤：

1. 酶标仪预热30min以上，调节波长至550 nm。
2. 工作液的配制：临用前根据用量按照试剂一（V）：试剂二（V）：试剂三（m）=1（mL）：1（mL）：0.66（g）的比例充分混匀。（注意：现用现配，用多少配多少，在空瓶中配制，试剂盒中带有4个空瓶，先将试剂一与试剂二混合，后再加入试剂三粉剂）

3、测定管：吸取600μL样本，加入200μL工作液，盖紧后震荡20 min，4℃，5000 rpm离心5 min，分层后取200μL上层有机相，加入100μL试剂四，摇匀，10 min后测定550 nm的吸光值，记为A测定。
4、空白管：吸取600μL萃取液，加入200μL工作液，盖紧后震荡20 min，4℃，5000 rpm离心5 min，分层后取200μL上层有机相，加入100μL试剂四，摇匀，10 min后测定550 nm的吸光值，记为A空白。
空白管只需测一次。△A=A测定-A空白
注意：1、有机溶剂易挥发，加入96孔板后应尽快检测。
2、测定管中加入的样本即样本前处理中的有机相待测液。