糖原合成酶(GCS)测试盒_可见分光光度法

供应商 ：上海晶抗生物工程有限公司

库存 ：665

样本 ：来电咨询

标记物 ：详见说明书

适应物种 ：来电咨询

应用 ：仅供科研研究使用

检测方法 ：可见分光光度法

规格 ：50管/48样

糖原合成酶(GCS)测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：50管/48样    
储存条件：低温保存
注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
GCS（EC 2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷键相连延长糖链，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰岛素作用的主要靶酶，对糖代谢的调节和血糖稳态的维持具有重要作用。

测定原理：
GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UDP，乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD⁺，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映GCS活性。

需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体45 mL×1瓶， 4℃保存； 
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体41μL×1支，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支， -20℃保存；
试剂五：粉剂×1瓶， -20℃保存；





测定步骤：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2. 工作液的配制：临用前将试剂三和试剂四转移到试剂一中混合溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3. 试剂五的配制：临用前在试剂五瓶中加入2.5mL试剂二充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
4. 将工作液和试剂五置于37℃预热5分钟。
5. 在1mL石英比色皿中加入50μL样本、50μL试剂五和900μL工作液，立即混匀，记录340nm处初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。

注意：在该试剂盒中，若ΔA大于0.1，需将样本用提取液稀释适当倍数后测定，使ΔA小于0.1可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。