慢病毒浓缩纯化试剂盒

库存 ：999

保质期 ：本品在 4℃可保存 6 个月，如需长期保存可‐20℃冻存。

供应商 ：百瑞极

保存条件 ：4℃/‐20℃冻存。

规格 ：200ml(5X)

产品简介：
  慢病毒浓缩液是基于沉淀法浓缩纯化慢病毒，纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心，全部纯化时间最短仅需 2 小时左右。可将病毒液浓度提高 30‐100 倍，病毒回收率 90%以上。我司慢病毒纯化试剂成分经过优化，在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定 24 小时以上。
NOTE：该试剂解冻后需要沉淀溶解涡旋混匀后才能使用。
所需试剂、耗材和仪器：
  冷冻离心机（50ml 或 15ml 容量）；0.45μm 针头滤器（推荐低蛋白结合 PES 膜）； 无菌 PBS 溶液。
操作步骤
1. 3000rpm 离心去除细胞碎片，上清液用 0.45um 过滤慢病毒上清液；
2. 每 30ml 过滤后的病毒初始液，加入慢病毒浓缩液母液 7.5 ml；
3. 每 20～30min 混合一次，共进行 3-5 次；
4. 4℃沉淀 1.5h 或者放置过夜；
5. 4℃，4000 g，离心 20min；
6. 吸弃上清，静置管子 1～2 分钟，吸走残余液体；
7. 加入适量的慢病毒溶解液（PBS）溶解慢病毒沉淀；
8. 集中后的病毒悬液分装成 50 μl 每份，保存在成品管中。用碎干冰速冻后储存在-80 ℃。
注意事项
1. 0.45um 的滤器过滤病毒液后的步骤要无菌操作
2. 推荐使用 0.45um 的滤器，0.22um 的会有一部分病毒损失
3. 病毒沉淀时要保持低温，冰浴或者 4°C 保持温度
4. 水平转子离心，病毒都在离心管底部；角转子离心，病毒会在离心管侧面沉淀，要注意吹打下去一起重悬。