细胞增殖实验价格_品牌:-丁香通官网

提供商：湘元生物

服务名称：细胞增殖

服务说明

众所周知，目前我们进行细胞增殖检测有多种方法，以下几种细胞增殖检测方法比较常见：

1、直接计数法，细胞计数法很简单，不需要特殊的试剂和仪器，所以对于场地和实验设备稀缺的实验人员来说，是比较好的选择，因为整个实验，只需利用血球计数板或细胞计数仪就可计算得出细胞数目。一般过程为接种21孔/24孔板细胞（如用培养瓶时则21瓶）。我们分7组，每组3孔（或瓶），培养一周，期间逐日检测一组，计数。把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。

这种直接计数方法主打简单、省钱，但这方法缺点也很明显，就是无法区分增殖细胞与非增殖细胞，不适合数量较多或特定亚群的细胞计数！

2、检测细胞代谢活性方法，这个细胞增殖检测方法是使用分光光度计或者酶标仪检测吸光度，从而间接测定活细胞数量，检测细胞增殖情况。主要实验方法有MTT、CCK-8、MTS、XTT及SRB法。其中MTT比色法，这个细胞增殖检测方法的实验原理就是活细胞内的线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以将淡黄色的MTT还原成蓝紫色结晶甲臜，用二甲基亚砜 (DMSO)溶解甲臜，测570nM波长下的OD值，溶液颜色的深浅与细胞数量成正比。

MTT法实验步骤：每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS配制) 20ul，继续孵育4 h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，脱色摇床振荡10min，使结晶物充分融解，测570nM波长下的OD值。

3、检测细胞DNA合成方法，这个方法是通过直接测定细胞的DNA合成含量来评价细胞的增殖能力，这是目前检测细胞增殖比较准确的方法，这个细胞增殖检测最常用的方法就是：BrdU/EdU检测法。Brdu中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷，为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体，ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度。

当然，实验室里，检测细胞增殖情况的方法还有很多种，但是由于篇幅有限，今天就只说了这几种，客户可根据处理药物数量等因素选择合适的检测方法。

实验流程：

1、细胞培养

2、加药处理

3、加入cck8/mtt孵育

4、吸光度值检测

5、数据分析

MTT法，原理很简单，就是MTT只能与活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶发生反应，而死细胞则没办法反应。

CCK-8检测实验原理是基于其反应机制，基于细胞线粒体呼吸活性的变化，即细胞内还原剂可以将CCK-8试剂内的三唑基四氮唑（WST-8）还原成有色产物。这种有色产物可以通过吸光度测量的方式进行定量分析，从而评估细胞数量和代谢活性。

MTT实验适用于各种类型的细胞，包括悬浮细胞和贴壁细胞，适用于细胞增殖和细胞毒性等方面的研究；

CCK8实验则更适用于细胞增殖和毒性检测、药物筛选、细胞治疗等方面的应用。

服务流程：