FrCas9核酸酶

       CRISPR-Cas核酸酶是目前最为广泛使用的基因编辑工具，在基础科研以及临床应用方面都有着广阔的应用前景^[1]。然而，目前应用最广泛的SpCas9始终面临的一个关键问题是脱靶效应。它会导致基因突变、甚至癌症等毒副作用，严重阻碍SpCas9在基础研究和临床中的应用^[2]。为了解决脱靶效应问题，近年来有许多的研究集中于对现有的SpCas9进行改造，提高其切割特异性^[3,4]。然而，改造后的SpCas9虽然脱靶效应明显减少，但其靶点切割活性也会受到影响。本项专利CRISPR-FrCas9是目前已知的切割效率最强、脱靶效应最低、特异性最好、PAM限制最少的CRISPR，显著优于SpCas9，极大程度保证了基因治疗的安全性及有效性。该研究也成功发表于《Nature Communications》中^[5]。

        FrCas9属于Type II-A型CRISPR，与SpCas9的同源性小于80%，体积为1372个氨基酸（图A、B）。FrCas9的PAM为5′-NNTA-3′，SpCas9的PAM为5′-NGG-3′，研究人员直接在人基因组上选择11个位点同步比较FrCas9与SpCas9及不同SpCas9高保真变体（SpCas9-HF1、HiFi-Cas9和eSpCas9）的切割效率及脱靶效应。结果显示，FrCas9的在靶reads数均高于SpCas9及其高保真变体，且FrCas9在多个位点均未检测到脱靶，说明FrCas9具有较高的切割效率以及较低的脱靶效应(图C、D)，为安全高效的基因编辑临床治疗及基础科研提供更多选择。

FrCas9产品优势

1、切割效率高：在NGTA PAM下，其切割效率高于SpCas9；

2、脱靶效应低：脱靶效应极低，甚至低于不同种类的高保真型SpCas9；

3、提供sgRNA设计服务及质粒构建服务；

4、专利授权费低于SpCas9，可进行授权合作。

 

关于舒桐

 珠海舒桐医疗科技有限公司深耕基因编辑技术10余年，是一家以基因编辑为核心技术的生物医药服务企业，可承接脱靶检测、细胞株定制、病毒包装等CRO及CDMO业务。目前，舒桐科技拥有3000㎡的GMP研发实验室及生产车间；拥有博士后科研工作站及澳门理工大学教学科研实习基地。研发团队熟练掌握各类基因编辑技术，包括基因编辑、碱基编辑及先导编辑等，成功完成如基因敲除、点突变、大片段插入、过表达等细胞系构建项目；开发了多种具有自主知识产权的脱靶检测技术，建立了高通量的sgRNA筛选平台；建立了工厂化新型CRISPR挖掘体系，已开发出多种切割效率高且低脱靶的新型CRISPR。公司目前已申请基因编辑、脱靶检测、新型CRISPR及药物递送等专利70+项，授权50+项。同时，公司具备先进的CGT原料规模化生产能力，产品质量达到领先水平，可为科研机构及生物医药企业提供安全高效的一站式服务和原料供应。舒桐科技坚持以“创新、敬业、融合、开放”为核心价值观，致力于利用基因治疗技术造福人类健康，让生命更美好。

参考文献

1. Cui Z, et al. FrCas9 is a CRISPR/Cas9 system with high editing efficiency and fidelity. Nature Communications 13, 1-12 (2022)
2. Fan W, et al. Non-homologous dsODN increases the mutagenic effects of CRISPR-Cas9 to disrupt oncogene E7 in HPV positive cells. Cancer Gene Ther, (2021)
3. Cui Z, et al. The comparison of ZFNs, TALENs, and SpCas9 by GUIDE-seq in HPV-targeted gene therapy. Mol Ther Nucleic Acids 26, 1466-1478 (2021)