大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶（1,3-βD-Glu）检测试剂盒

库存 ：999

供应商 ：上海佰利莱生物科技有限公司

检测限 ：咨询

检测方法 ：酶联免疫法

应用 ：科研实验

适应物种 ：人，小鼠，大鼠，植物，鱼，虾，蟹，牛，羊，狗，猫，微生物，细胞，土壤等动植物

标记物 ：elisa试剂盒

样本 ：血清，血浆，唾液，尿液，组织，细胞上清，裂解液等

规格 ：96T/48T

试验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)水平。用纯化的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1),再与HRP标记的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中调亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)浓度。
自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

操作注意事项:

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂，应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用，保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液，使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A易挥发，避免长时间打开盖子，底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒，实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤:

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，每个标准品和空白孔建议做复孔，每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次，如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

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