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英文名 :虾碱性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)
保质期 :1年
供应商 :上海酶联生物科技有限公司
保存条件 :避光低温保存
规格 :500U/5000U
虾碱性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)描述:
虾碱性磷酸酶催化 DNA 和 RNA 的 5’和 3’磷酸单脂的去磷酸化反应,也可水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。该磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,可使线性载体去磷酸化,防止自连。虾碱性磷酸酶在 65°C 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之后,可以不用去除热敏磷酸酶。基于以上特性,该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性磷酸酶(CIP)的绝-佳替代物。
应用
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备 5´末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1 单位指在 25°C 条件下,30 分钟能使 1 μg 经HindIII(产生 5’突出末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制>95%的 DNA 再连接。
使用注意事项:
(1)1×SAP Buffer:50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0,1mMMgCl2,0.1 mM ZnCl2,25°C 温育。
(2)热失活:65°C 加热 5 分钟,不可逆失活。该酶通常用于酶切载体的去磷酸化,因其不可逆热失活特性。当完成去磷酸化反应后,无需再纯化产物,可以直接用于后续连接反应。
(3)虾碱性磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化,可直接用于下游实验。
上海酶联生物科技有限公司
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