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技术简介
m7G RNA甲基化是在甲基化转移酶的作用下，使RNA鸟嘌呤（G）的第七位N上加上甲基的一种修饰（N7-methylguanosine，m7G）。研究表明，m7G RNA甲基化修饰存在于各类分子中，包括：mRNA 5’帽子结构、mRNA内部、pri-miRNA、转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。m7G RNA甲基化修饰能够调节mRNA的转录、miRNA的生物合成和生物学功能、tRNA稳定性、18S rRNA的核内加工及成熟。m7G RNA甲基化修饰作为一类新型RNA甲基化，近两年高影响因子文章不断，是继m6A修饰之后的又一表观转录组学热点。
云序生物提供两种m7G RNA甲基化测序服务：（1）m7G RNA甲基化单碱基测序，可对m7G修饰进行高通量检测和单碱基定位；（2）MeRIP测序，可通过m7G特异性抗体，抓取有甲基化修饰的片段进行测序，对m7G修饰进行高通量测序和peak峰定位。此外，云序生物针对m7G RNA甲基化开发了多款产品，可实现对mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多类RNA分子的m7G甲基化修饰水平的**检测。
云序优势
单碱基分辨
可对全转录组范围内的m7G位点进行高通量地平行检测。
全分子覆盖
可**地对环状RNA、mRNA、lncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多类RNA分子的m7G位点进行检测。
一站式服务
客户*需提供组织或细胞，云序生物一站式完成RNA抽提，样品预处理，建库，测序，数据分析全套流程。
专业的生物信息学分析
专业的生物信息学团队，能够满足客户的各类深入数据分析需求
案例分析
案例1：哺乳动物mRNA内m7G甲基化转录组图谱
原文：Transcriptome-wide Mapping of Internal N7-Methylguanosine Methylome in Mammalian mRNA
期刊：Molecular Cell
影响因子：14.25
由于全部种类的反转录酶均无法将RNA m7G位点逆转录成对应发生碱基突变的cDNA，为了准确的探究RNA内m7G甲基化情况，何川团队利用m7G自带正电荷的特征，开发了新的m7G单碱基深度测序方法。该方法能够将RNA内含m7G位点转化为另一种可产生反转录碱基变异的新位点，并依据碱基变异率估计m7G位点的甲基化水平。此方法随后也被证实可检测18S rRNA中的1639位内含m7G位点以及可揭示人类细胞tRNA中的22个46位内含m7G位点。并观测到其在mRNA分布、富集的共有序列及其它统计特征与m7G-MeRIP-seq数据基本保持一致。该文章不*揭示了m7G甲基化在人类细胞中的分布特征，同时还发现METTL1是一种甲基转移酶，它在mRNA中催化了m7G甲基化修饰，并表明m7G的内部甲基化可以影响mRNA的翻译。
(A) Hela和HepG2细胞进行m7G单碱基深度测序：10个代 表性的mRNA内m7G修饰结果展示。(C) 801个m7G位点的mRNA特征。（E）前7个mRNA内 m7G motif在mRNA中的分布百分比。
案例2：METTL1通过m7G甲基化促进let-7 MicroRNA的加工
原文：METTL1 Promotes let-7 MicroRNA Processing via m7G Methylation
期刊：Molecular Cell
影响因子：14.25
剑桥大学戈登研究所和病理学系中心，借助m7G RNA甲基化测序技术，识别了A549细胞中miRNA具有m7G甲基化修饰。该研究发现Mettl1调控的pri-let7 m7G修饰通过改变pri-let7中G-四重结构，进一步调控pre-let7和let7的表达，影响肺ai细胞迁移。该研究揭示了Mettl1依赖的m7G甲基化修饰可以作为调控miRNA结构、生物发生和细胞迁移的一种新的RNA修饰。
样品类型
细胞、组织或RNA，其他样本类型请电询。
测序样品量
1.单碱基测序方式：
a) 细胞：≥1×108
b) 组织：500 mg - 5 g
c) RNA：100 μg - 300 μg
2. MeRIP测序方式：
a) 细胞：≥2×107
b) 组织：100mg - 1g
c) RNA：30 μg - 300 μg
d) 超微量满足500 ng - 30 μg
样品运输及保存
样品运输：样品置于1.5mL离心管中，封口膜封好，干冰运输。
样品保存：细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存；RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。
m7G RNA甲基化是在甲基化转移酶的作用下，使RNA鸟嘌呤（G）的第七位N上加上甲基的一种修饰（N7-methylguanosine，m7G）。研究表明，m7G RNA甲基化修饰存在于各类分子中，包括：mRNA 5’帽子结构、mRNA内部、pri-miRNA、转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）。m7G RNA甲基化修饰能够调节mRNA的转录、miRNA的生物合成和生物学功能、tRNA稳定性、18S rRNA的核内加工及成熟。m7G RNA甲基化修饰作为一类新型RNA甲基化，近两年高影响因子文章不断，是继m6A修饰之后的又一表观转录组学热点。
云序生物提供两种m7G RNA甲基化测序服务：（1）m7G RNA甲基化单碱基测序，可对m7G修饰进行高通量检测和单碱基定位；（2）MeRIP测序，可通过m7G特异性抗体，抓取有甲基化修饰的片段进行测序，对m7G修饰进行高通量测序和peak峰定位。此外，云序生物针对m7G RNA甲基化开发了多款产品，可实现对mRNA、LncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多类RNA分子的m7G甲基化修饰水平的**检测。
云序优势
单碱基分辨
m7G RNA甲基化单碱基测序方式，可对m7G甲基化修饰进行单碱基定位。
抗体富集效率高
m7G MeRIP测序方式，采用预验证的商业化抗体和精心优化的实验流程，具有极高的效率和特异性。
可对全转录组范围内的m7G位点进行高通量地平行检测。
全分子覆盖
可**地对环状RNA、mRNA、lncRNA、pri-miRNA、tRNA和rRNA等多类RNA分子的m7G位点进行检测。
一站式服务
客户*需提供组织或细胞，云序生物一站式完成RNA抽提，样品预处理，建库，测序，数据分析全套流程。
专业的生物信息学分析
专业的生物信息学团队，能够满足客户的各类深入数据分析需求
案例分析
案例1：哺乳动物mRNA内m7G甲基化转录组图谱
原文：Transcriptome-wide Mapping of Internal N7-Methylguanosine Methylome in Mammalian mRNA
期刊：Molecular Cell
影响因子：14.25
由于全部种类的反转录酶均无法将RNA m7G位点逆转录成对应发生碱基突变的cDNA，为了准确的探究RNA内m7G甲基化情况，何川团队利用m7G自带正电荷的特征，开发了新的m7G单碱基深度测序方法。该方法能够将RNA内含m7G位点转化为另一种可产生反转录碱基变异的新位点，并依据碱基变异率估计m7G位点的甲基化水平。此方法随后也被证实可检测18S rRNA中的1639位内含m7G位点以及可揭示人类细胞tRNA中的22个46位内含m7G位点。并观测到其在mRNA分布、富集的共有序列及其它统计特征与m7G-MeRIP-seq数据基本保持一致。该文章不*揭示了m7G甲基化在人类细胞中的分布特征，同时还发现METTL1是一种甲基转移酶，它在mRNA中催化了m7G甲基化修饰，并表明m7G的内部甲基化可以影响mRNA的翻译。
(A) Hela和HepG2细胞进行m7G单碱基深度测序：10个代 表性的mRNA内m7G修饰结果展示。(C) 801个m7G位点的mRNA特征。（E）前7个mRNA内 m7G motif在mRNA中的分布百分比。
案例2：METTL1通过m7G甲基化促进let-7 MicroRNA的加工
原文：METTL1 Promotes let-7 MicroRNA Processing via m7G Methylation
期刊：Molecular Cell
影响因子：14.25
剑桥大学戈登研究所和病理学系中心，借助m7G RNA甲基化测序技术，识别了A549细胞中miRNA具有m7G甲基化修饰。该研究发现Mettl1调控的pri-let7 m7G修饰通过改变pri-let7中G-四重结构，进一步调控pre-let7和let7的表达，影响肺ai细胞迁移。该研究揭示了Mettl1依赖的m7G甲基化修饰可以作为调控miRNA结构、生物发生和细胞迁移的一种新的RNA修饰。
图注：m7G在miRNA生物发生中的作用
样本要求
样品类型
细胞、组织或RNA，其他样本类型请电询。
测序样品量
1.单碱基测序方式：
a) 细胞：≥1×108
b) 组织：500 mg - 5 g
c) RNA：100 μg - 300 μg
2. MeRIP测序方式：
a) 细胞：≥2×107
b) 组织：100mg - 1g
c) RNA：30 μg - 300 μg
d) 超微量满足500 ng - 30 μg
样品运输及保存
样品运输：样品置于1.5mL离心管中，封口膜封好，干冰运输。
样品保存：细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存；RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。
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