人肺癌组织淋巴细胞分离液KIT

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保质期 ：一年

供应商 ：上海烜雅生物科技有限公司

保存条件 ：-20

产品说明书
组织淋巴细胞分离液 KIT
产品货号及规格：
货号 产品名称 规格
XY9005 人肺癌组织淋巴细胞分离液 KIT 200 mL
XY9006 人脏器组织淋巴细胞分离液 KIT 200 mL
XY9007 人乳汁淋巴细胞分离液 KIT 200 mL
产品组分及含量
XY9005、XY9006、XY9007组分 含量
A. 人肺癌组织/人脏器组织/人乳汁淋巴细胞分离液 200 mL
B. 样本稀释液 200 mL
C. 清洗液 200 mL
D. 洗涤液 200 mL
E. 匀浆冲洗液 200 mL
F. 10mL无菌硅化离心管 5支
储存条件
常温保存，有效期见外包装。本品易感染细菌，需无菌条件
操作，启封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白
色结晶，影响分离效果。


产品介绍
用于分离人脏器组织淋巴细胞。
使用方法
1. 组织样本的制备
（1） 取组织块称重后，用眼科剪刀无菌操作，将组织剪成
小块。
（2） 将组织块放在 70 μm细胞筛网（产品货号：H9019）
上，用研磨器反复研磨，边研磨边加入组分 E匀浆冲洗液
（以 0.1 g 组织为例，约加5-8 mL），使细胞全部通过筛网
滴到离心管中。
（3） 弃去筛网，组织研磨液经 450 g，离心 10 min，弃上
清。
（4） 用组分 B 样本稀释液 （如需另购， 产品货号： H9044）
重悬组织细胞， 将细胞悬液细胞浓度调整为 2×108
-1×109
/mL
（以 0.1 g 组织为例，约使用 1 mL 样本稀释液重悬细胞），
备用。
2. 检验方法
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下
进行。
（1） 取一支干净的离心管， 加入与组织单细胞悬液等量的
分离液（组分 A），400-500 g，离心 3-5 min。（注：分离
液最少不得少于 3 mL）
（2） 用一次性吸管小心吸取组织单细胞悬液加于分离液
液面上，400-500 g，离心 20-30 min。
（注：根据组织单细胞悬液量确定离心条件，组织单细胞悬
液量越大，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客
户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
（3） 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为
稀释液层，第二层为环状乳白色淋巴细胞层，第三层为透明
分离液层，第四层为红细胞层。
（4） 用一次性吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞
层到另一干净 15 mL 离心管中，向离心管中加入 10 mL 组
分 D 洗涤液（如需另购，产品货号：H9046），混匀细胞。
（5） 250 g，离心 10 min。
（6） 弃上清。
（7） 用一次性吸管吸取 5 mL 组分 C 清洗液（如需另购，
产品货号：H9045）重悬所得细胞。
（8） 250 g，离心 10 min。
（9） 重复清洗两次，弃上清后以 0.5 mL 后续实验所需相
应液体重悬细胞。
注意事项
1. 全过程样本、 试剂及实验环境均需在 20 ± 2℃的条件下进
行。为获得最佳的实验结果，最好在取样 2 h内进行实验，
样品存放时间越长，细胞分离效果越差。样品放置超过 6 h
后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
2. 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料
制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻
璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面
会变成毛面，影响细胞分离效果。
3. 吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交界处
的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加。
4. 分离液用量大于组织单细胞悬液样本时，分离效果更佳。

本产品仅用于科研。
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