文献支持外泌体表征-WB

提供商 ：北京恩泽康泰生物科技有限公司

服务名称 ：外泌体表征-WB

服务项目简介

外泌体鉴定即外泌体表征，主要是为了证明分离获得的细胞外囊泡是外泌体，具有外泌体的结构特征，粒径特征和蛋白marker。MISEV2018提示了外泌体研究最基本的实验，其中外泌体的表征主要分为两部分：总体水平表征外泌体标志蛋白和单囊泡水平表征外泌体拓扑结构和粒径；目前文章发表最常用的外泌体表征3项包括WB表征外泌体标志蛋白，电镜表征外泌体形态特征和纳米流式表征外泌体粒径特征。

总体表征

蛋白鉴定：应用Western Blot或流式细胞术对EVs的阳性标志物和阴性标志物进行表征。其中包括至少3个阳性（至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白）、1个阴性蛋白质标志物。

WB结果示例
WB是经典的研究蛋白表达的实验手段。基于外泌体的生物学生成方式和前期研究，外泌体具有一些认可度高的的marker蛋白；通过比较混合细胞与外泌体的marker蛋白和阴性蛋白的表达差异，证实分离获得的囊泡高表达外泌体marker蛋白。

检测平台

Tanon VE180

送样要求

提供外泌体悬液即可，我公司同时提供外泌体分离服务，也可送原始样本先分离外泌体。

物种要求：人和鼠

1.送样体积不少于300μl；
2.建议BCA浓度≥250μg/ml；

如有任何疑问，请来电咨询：01069739599。
 

样本寄送

1. 一般不上门取样，做电镜和NTA的外泌体样本请4℃保存，冰袋运输寄送。做Western blot，请将外泌体干冰运输；

2. 寄送样本时，请务必随样本附带一份纸质版订单，以免因无法确认而造成样本丢失或影响样本核对入库；

3. 生物样本应避免反复冻融。请在寄出样本后将物流信息填入订单。

 

鉴定周期

<10个样本，12个工作日
 

交付内容及方式

1. 交付3阳1阴即4个蛋白的鉴定结果；

2. 外泌体鉴定报告发送至委托人所留邮箱；

3. 全款到账后交付所有检测原始结果；或个人先付押金，交付所有检测数据及外泌体，公司对公账户收到全款后将押金原路退回。

 

风险预警

公司承诺按照最佳方案开展实验并客观提供结果，但是由于对鉴定结果的评估存在主观性，请您在确认接受如下风险后再安排送样：

1. 电镜结果中可能存在杂蛋白或背景深。由于不同样本间存在明显差异，有些样本如血浆等含有大量杂蛋白，可能会出现电镜背景杂乱的情况，不会影响文章发表。

2. Western blot检测可能存在条带深或无条带。因为外泌体蛋白marker相对常规组织、细胞蛋白来说，丰度相当低，需要极高灵敏度和特异性的抗体，尤其是非-常规模式生物的抗体可能无法达到Western Blot的检测精度，会出现不出条带的情况。且外泌体对装载分子具有一定的选择性，所以可能某些蛋白丰度高条带深或无条带。

服务说明
针对外泌体样本只提供鉴定服务的项目，由于样本来源不同且外泌体分离实验的特殊性，乙方在保证优质服务的前提下客观呈现实验结果。

风险约定
公司承诺按实验方案进行实验并提供客观实验结果，但由于科学实验中存在诸多不确定因素从而导致结果的不确定性，公司不保证实验结果与客户设想一致。因此在得不到预期实验结果的情况下，客户仍然要向公司支付本次技术服务的全部已发生费用。